[发明专利]一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法在审
| 申请号： | 202210487593.3 | 申请日： | 2022-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN114958749A | 公开（公告）日： | 2022-08-30 |
| 发明（设计）人： | 李彦敏;武永淑;秦晓东;张志东;殷相平;孙跃峰 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/6888;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 马鑫 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 线粒体 折叠 蛋白 反应 体系 建立 方法 | ||
1.一种线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein response,UPRMT)体系的建立方法，其特征在于，包括用Gamitrinib-TPP(G-TPP)处理人源细胞系的步骤。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)根据G-TPP分子式，合成高纯度TRAP1抑制剂G-TPP；
2)将步骤1)中所述的G-TPP在DMSO中稀释成10mmol/ml的储存液；
3)用含10vol％血清的培养基培养人源化细胞，待细胞铺满90％以上，添加步骤2)中的G-TPP储存液，使其终浓度为10μmol/ml，处理2-6h。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3)中的处理时间为4h。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，还包括对UPRMT相关转录分子和分子伴侣的表达水平进行检测的步骤。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的检测是指采用qRT-PCR的方法对UPRMT相关转录分子和分子伴侣的表达水平进行检测。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的UPRMT相关转录分子和分子伴侣包括ATF4，DDIT3，HSP60和HSPE1。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，G-TPP处理后，与对照组相比，ATF4，DDIT3，HSP60和HSPE1在转录水平显著上调表达。
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