[发明专利]一种麋鹿角特征肽段及其检测方法

说明书

本发明公开了一种麋鹿角特征肽段及其检测方法，本发明通过大量实验筛选，筛选出序列为Gly‑Ser‑Hyp‑Gly‑Gly‑Hyp‑Gly‑Ala‑Ala‑Gly‑Phe‑Hyp‑Gly‑Gly‑Arg、Gly‑Leu‑Ala‑Gly‑Pro‑Hyp‑Gly‑Met‑Hyp‑Gly‑Ala‑Arg与Gly‑Leu‑Thr‑Gly‑Pro‑Ile‑Gly‑Pro‑Hyp‑Gly‑Pro‑Ala‑Gly‑Ala‑Hyp‑Gly‑Asp‑Hyl的麋鹿角特征肽段，这3条麋鹿角特征肽段具有很高的特异性，可用于区分麋鹿角、马鹿角及梅花鹿角。本发明提供的麋鹿角特征肽段及其检测方法，通过大量实验筛选出最佳的色谱条件和质谱条件，整个方法操作简单，判断准确，能准确将来源于近缘物种的角类药材，麋鹿角、马鹿角及梅花鹿角进行区分。本发明提供的麋鹿角特征肽段及其检测方法，有利于麋鹿角的质量控制，对保证含有麋鹿角产品的质量具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及一种动物药的检测鉴别方法，具体涉及麋鹿角特征肽段及其检测方法。

背景技术

麋鹿种群数量不断壮大，麋鹿角的拾取量呈逐年递增趋势，其药用地位的恢复问题受到越来越多的关注。近年来围绕麋鹿角补阴、抗衰老、抗抑郁等功效多有研究，但尚未有针对其质量标准的相关研究。

本发明通过检测2个麋鹿角特征肽段来检测麋鹿角成分，该方法为麋鹿角质量研究提供了参考与依据，有利于麋鹿角及其制品质量标准进一步完善，为麋鹿角药材质量标准的制定提供理论参考，为麋鹿角药用资源的产业化发展奠定基础，为其临床用药提供科学依据。

发明内容

本发明主要目的是针对上述存在的不足，提供一种麋鹿角特征肽段及检测角类动物药中麋鹿角特征肽段的方法。本发明提供的麋鹿角特征肽段专属性强。提供的方法操作简单，灵敏度高，能准确鉴定角类动物药中是否含有麋鹿角成分，为保证麋鹿角及其制品的质量提供科学方法。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种麋鹿角特征肽段，所述的特征肽段序列如序列表1：

特征肽段1：Gly-Ser-Hyp-Gly-Gly-Hyp-Gly-Ala-Ala-Gly-Phe-Hyp-Gly-Gly-Arg；

特征肽段2：Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Hyp-Gly-Met-Hyp-Gly-Ala-Arg；

特征肽段3：Gly-Leu-Thr-Gly-Pro-Ile-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Ala-Gly-Ala-Hyp-Gly- Asp-Hyl；

内参肽段：Gly-Glu-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ile-Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Arg。

一种麋鹿角特征肽段的检测方法，包括以下步骤：

(1)将麋鹿角的特征肽段1、特征肽段2及内参肽段配成对照品溶液；

(2)将待检测角类动物药样品提取蛋白质后，用蛋白酶进行酶切后，将酶解液和步骤 (1)对照品溶液注入液质联用仪，以麋鹿角特征肽段为对照，采用多反应监测模式，选择条件为：特征肽段1：m/z 645.3双电荷→573.3，DP＝80.00，CE＝35.00、特征肽段2：m/z556.8，双电荷→407.8，DP＝78.51，CE＝29.36、特征肽段3：m/z 804.40双电荷→448.2，DP＝144.01， CE＝37.80、内参肽段：m/z 781.4双电荷→556.3，DP＝91.00，CE＝41.40，进行检测，进行检测，根据检测出上述离子情况对麋鹿角、马鹿角、梅花鹿角进行区分。