[发明专利]一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法及其应用

权利要求书

1.一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，采用聚乙烯吡咯烷酮PVP修饰后的氮化硼纳米颗粒负载Toll样受体激动剂R837，具体包括以下步骤：

步骤1，基于化学气相沉积法和水中超声处理构建氮化硼纳米颗粒

将硼酸和尿素按照1:3的摩尔比溶解于甲醇水溶液中形成混合溶液，将混合溶液在45℃下搅拌12h后混合溶液重结晶，对混合溶液进行过滤得到白色结晶粉末，将白色结晶粉末置于石英管式炉中热解得到h-BNNs，再将h-BNNs溶解于水中得到分散体系，通过对分散体系离心、过滤后，利用探入式超声仪对分散体系进行水中超声处理，并将分散体系冷冻干燥制得氮化硼纳米颗粒；

步骤2，利用氮化硼纳米颗粒和聚乙烯吡咯烷酮PVP制备BN@PVP

将氮化硼纳米颗粒溶解于水中得到BN溶液，向BN溶液中加入聚乙烯吡咯烷酮PVP形成混合物，搅拌16～18h，利用探入式超声仪对混合物进行水中超声处理后，再对混合物进行离心处理并洗涤至少3次，得到聚乙烯吡咯烷酮PVP修饰后的氮化硼纳米颗粒BN@PVP；

步骤3，将Toll样受体激动剂R837加载至BN@PVP中制得BN-R837@PVP

将氮化硼纳米颗粒BN@PVP溶解于水中得到氮化硼纳米颗粒溶液，再将Toll样受体激动剂R837溶解于二甲基亚矾DMSO中后与氮化硼纳米颗粒溶液混合得到混合体系，将混合体系在45℃下搅拌12h后，对混合体系进行至少3次离心处理，去除未加载至氮化硼纳米颗粒上的Toll样受体激动剂R837后，得到负载有Toll样受体激动剂R837的BN-R837@PVP；

步骤4，利用紫外-可见分光光度计对BN-R837@PVP进行测量，获取R837在紫外可见吸收光谱中的特征吸收峰，确定BN-R837@PVP中R837的负载率。

2.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，所述步骤1中，甲醇水溶液中甲醇和水的体积比为1:1。

3.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，所述步骤1中，利用石英管式炉对白色结晶粉末进行热解时，石英管式炉的温度不超过1000℃。

4.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，所述步骤1中，利用探入式超声仪对氮化硼溶液进行水中超声处理时，氮化硼溶液的温度为4～37℃。

5.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，所述步骤2中，BN溶液的浓度为100μg/mL，聚乙烯吡咯烷酮PVP的添加量为1mg/ml。

6.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，所述步骤2中，BN@PVP的平均粒径为220nm。

7.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法，其特征在于，所述步骤3中，氮化硼纳米颗粒溶液的浓度为0.1mg/mL。

8.根据权利要求1所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法在肿瘤BNCT治疗中的应用。

9.根据权利要求8所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法在肿瘤BNCT治疗中的应用，其特征在于，用于激活细胞的抗肿瘤免疫反应。

10.根据权利要求8所述的一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法在肿瘤BNCT治疗中的应用，其特征在于，通过增加肿瘤中CD4⁺细胞和CD8⁺T细胞的浸润，抑制肿瘤的生长和转移。