[发明专利]一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法及其应用

说明书

本发明涉及化学和生物医学肿瘤诊疗技术领域，提供了一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法及其应用。本发明方法基于化学气相沉积法和水中超声处理构建氮化硼纳米颗粒，再利用聚乙烯吡咯烷酮PVP对氮化硼纳米颗粒进行修饰制得BN@PVP，最后将Toll样受体激动剂R837加载至BN@PVP中制得BN‑R837@PVP，并将制得的BN‑R837@PVP应用于肿瘤BNCT治疗中。本发明方法应用于BNCT治疗时能够提高树突状细胞的交叉呈递效率，有效激活细胞的抗肿瘤免疫，引起肿瘤内CD4⁺细胞和CD8⁺T细胞的扩增，增加肿瘤组织中的CD4⁺和CD8⁺T细胞浸润，有效抑制远端肿瘤的生长和转移，还能激发个体表现出强大的记忆T细胞效应，能够在体内诱导产生高效且长期的抗肿瘤免疫，为开发新型BNCT肿瘤疫苗提供了新思路。

技术领域

本发明涉及化学和生物医学肿瘤诊疗技术领域，具体涉及一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法及其应用。

背景技术

硼中子俘获治疗(Boron neutron capture therapy,BNCT)作为一种细胞水平的二元精准治疗体系，其利用稳定性同位素¹⁰B原子的高热中子俘获截面吸收低能热中子发生核裂变，产生α粒子和反冲的锂原子核⁷Li。由于α粒子的穿透距离仅为4～9μm，α粒子的能量能够在单个细胞内沉积，实现了对单个细胞的特异性杀伤，这就使得利用高线性能量转移(High linear energy transfer,high-LET)成为应对恶性肿瘤的重要治疗方法。

目前，BNCT已经应用于恶性脑胶质瘤以及一些解剖结构特殊且难以治疗的实体瘤中，并取得了不错的治疗效果，BNCT作为肿瘤特异性的治疗方法具有很多优点，但其在体内应用时对于硼药的肿瘤靶向性有着极其严苛的要求。BNCT需要¹⁰B原子在肿瘤组织中蓄积超过20ppm，且为了减少¹⁰B原子对正常组织的损伤，需要控制¹⁰B原子在肿瘤组织和正常组织中的分布比不低于3，该分布比使得BNCT在体内应用的发展受到了严重阻碍。但是，BNCT在体外应用时要求的硼含量易于实现，且现阶段已经实现了硼药在肿瘤细胞内超过20ppm的蓄积，具备良好的体外BNCT条件。因此，发展基于硼药低依赖的体外BNCT，克服硼药对于BNCT的限制，对于促进BNCT的发展和应用极其重要。

肿瘤疫苗作为一种新型的肿瘤治疗方式，基于体外生物工程的方法构建疫苗，其治疗效果不依赖于药物体内的靶向富集，肿瘤疫苗的应用为BNCT提供了新的研究速录和应用途径，其原理是在细胞因子、趋化因子等佐剂的辅助下，利用肿瘤细胞自身的肿瘤抗原，激活或增强机体自身的免疫系统杀伤肿瘤细胞，达到控制和清除肿瘤的目的。2010年4月，美国食品药品监督管理局(FDA)批准将Provenge/Sipuleucel-T用于晚期前列腺癌的治疗中，标志着第一个治疗性癌症疫苗的诞生。但是，肿瘤细胞自身的免疫原性较低，如何提高肿瘤细胞的免疫原性成为了肿瘤疫苗制备的关键，诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡(Immunogenic Cell Death,ICD)可以促进肿瘤抗原的暴露，提升抗原提呈。最新研究证实，放疗、化疗以及光热治疗等方式都可以诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡，促进抗原提呈，激活T细胞应答，所以放疗、化疗和光热治疗等方式均可以用于制备肿瘤疫苗，而BNCT在体外作为一种高效杀伤肿瘤细胞和诱导免疫原性细胞死亡的放疗治疗方法，在肿瘤疫苗开发中具有很大的应用前景。因此，亟需提出一种基于BNCT的肿瘤抗原制备方法及其应用，利用体外BNCT研发肿瘤疫苗，为BNCT应用于肿瘤治疗时过度依赖硼药的难题提供有效的解决途径，促进抗肿瘤免疫的发展。

发明内容