[发明专利]一种靶向检测CAH候选基因的二代测序试剂盒

权利要求书

1.一种靶向检测CAH候选基因的二代测序试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：DNA提取试剂、特异性扩增引物、多重PCR引物、多重PCR扩增试剂。

2.一种如权利要求1所述靶向检测CAH候选基因的二代测序试剂盒构建方法，包括：

(1)确定CAH候选基因，具体为CYP21A2、CYP17A1、CYP11B1、HSD3B2、StAR、CYP11A1、POR、H6PD、CYP11B2；

(2)设计CYP21A2基因PCR扩增引物，进行特异性扩增；

(3)设计9个候选基因的多重PCR扩增引物；

(4)进行CYP21A2多重PCR扩增；其他8个候选基因进行多重PCR扩增，然后将扩增产物混合；

(5)进行文库构建和扩增、测序；

(6)测序数据分析。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中PCR扩增引物为：

CYP21A2-F CGGACACTATTGCCTGCACAGTTG；

CYP21A2-R GAATTAAGCCTCAATCCTCTGCAGCG。

4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(4)中CYP21A2多重PCR产物于与其他8个候选基因的多重PCR产物混合比为1:50。

5.根据权利要求2所述方法，其特征在于，步骤(6)中修改比对基因组序列，用N代替假基因序列，进行测序数据分析。

6.一种CAH基因诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述二代测序试剂盒联合多重连接依赖探针扩增MLPA试剂盒。

7.根据权利要求6所述试剂盒，其特征在于，所述多重连接依赖探针扩增MLPA试剂盒用于检测CYP21A2拷贝数变异。