[发明专利]一株分泌抗除草醚单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用在审
申请号: | 202210509567.6 | 申请日: | 2022-05-11 |
公开(公告)号: | CN114807050A | 公开(公告)日: | 2022-07-29 |
发明(设计)人: | 胥传来;王鹏;匡华;徐丽广;孙茂忠;吴晓玲;刘丽强;马伟;朱建平;郝昌龙;宋珊珊;吴爱红;郭玲玲;胥欣欣 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/44;C07K14/765;C07K14/77;C07C201/12;C07C205/60;G01N33/577;G01N33/53;G01N33/52;C12R1/91 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 苏张林 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分泌 除草 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
1.一株分泌抗除草醚单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述的杂交瘤细胞株于2022年03月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC No.45113,本发明所得的杂交瘤细胞株属于单克隆细胞株。
2.一株分泌抗除草醚单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,
S1、将甲羧除草醚溶于有机溶剂,加入碱性溶液加热至50-80℃回流反应10-14h,得到除草醚半抗原;
S2、使用S1中所述除草醚半抗原制备除草醚完全抗原,将所得的除草醚完全抗原制备成含抗原弗氏完全佐剂与含抗原弗氏不完全佐剂;
S3、对免疫动物进行首次免疫、加强免疫和冲刺免疫,首次免疫采用S2中所述含抗原弗氏完全佐剂,加强免疫采用S2中所述含抗原弗氏不完全佐剂,冲刺免疫采用S2中所述除草醚完全抗原;
S4、取S3中冲刺免疫后的免疫动物的脾细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合,得到所述抗除草醚单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,在S1中,所述除草醚半抗原结构式如下:
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,在S2中,所述除草醚完全抗原的制备方法包括如下步骤,将所述除草醚半抗原、N-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基碳二亚胺盐酸盐溶解于溶剂中,反应得到混合液,后将混合液加入到载体蛋白溶液中进行反应,得到所述除草醚完全抗原。
5.权利要求1中所述杂交瘤细胞株在制备除草醚单克隆抗体中的应用。
6.一种除草醚单克隆抗体,其特征在于,所述除草醚单克隆抗体由权利要求1中所述杂交瘤细胞株分泌得到。
7.一种组合物,其特征在于,所述组合物中含有权利要求1所述的杂交瘤细胞株和/或权利要求6所述的除草醚单克隆抗体。
8.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中含有权利要求1所述的杂交瘤细胞株、权利要求6所述的除草醚单克隆抗体和权利要求7所述的组合物中的一种或多种。
9.一种试纸条,其特征在于,所述试纸条含有权利要求1所述的杂交瘤细胞株、权利要求6所述的除草醚单克隆抗体、权利要求7所述的组合物和权利要求8所述的试剂盒中的一种或多种。
10.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株、权利要求6所述的除草醚克隆抗体、权利要求7所述的组合物、权利要求8所述的试剂盒或权利要求9所述的试纸条在检测除草醚或甲羧除草醚中的应用。
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