[发明专利]提高裂殖壶菌的DHA产量的方法和微生物油脂的制备方法

说明书

本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高裂殖壶菌的DHA产量的方法，该方法包括：将裂殖壶菌接种至种子培养基中进行种子培养后得到种子液，将所述种子液以体积比0.5‑10%接种至添加有辅助因子的发酵培养基中进行发酵培养；所述辅助因子为N,N‑二氧喹恶啉‑2‑甲醛和/或3‑甲基‑喹恶啉‑2‑羧酸，相对于1L的所述发酵培养基，所述辅助因子的添加量为10‑200μmol。此外，本发明还公开了一种微生物油脂的制备方法。该提高裂殖壶菌的DHA产量的方法能够提高裂殖壶菌中DHA的产量。

技术领域

本发明涉及微生物发酵领域，具体涉及一种提高裂殖壶菌的DHA产量的方法和微生物油脂的制备方法。

背景技术

二十二碳六烯酸（DHA）是一种重要的长链多不饱和脂肪酸（PUPA），对人体具有至关重要的生理功能，且人体不能合成，必须通过饮食摄入。DHA对婴幼儿的大脑生长发育起到重要作用，可以促进其神经系统的发育。除此之外，DHA还具有降低血脂、治疗动脉粥样硬化、缓解阿尔兹海默症等功效，因此DHA饱受人们的关注。

目前商业上的DHA主要来源于海洋鱼类，鱼油作为其丰富来源因为气味腥臭、稳定性差等原因，大大限制了其作为食品添加剂和食品辅料的使用。且鱼油的供应和质量还受到季节和天气的变化、有毒重金属污染等因素的影响。从鱼油中提取DHA存在成本高、易氧化、有鱼腥味、产品不稳定等缺点，无法满足市场需求。

裂殖壶菌（Schizochytrium）是属于真菌门（Eumycota）、卵菌纲（Oomycetes）、水霉目（Saprolegniales）、破囊壶菌科（Thraustochytriaceae）的一类海洋真菌，因其生长速率快且富含多不饱和脂肪酸，生长繁殖不受季节影响，一直被视为具有工业化生产DHA潜力的微生物。

虽然有人通过喹禾灵2-[4-(6-氯-2-喹恶啉氧基)-苯氧基]丙酸乙酯筛选出诱变中的微藻中EPA含量提高的株系，但是，乙酰辅A羧化酶是一种脂肪酸合成的关键酶，而喹禾灵是该酶的抑制剂，在喹禾灵的存在下，细胞会因为脂肪酸生物合成受阻而生长缓慢甚至死亡。基于上述原因，技术人员对将喹恶啉及其衍生物用于提高微生物中DHA含量是有技术偏见的。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的喹恶啉及其衍生物不能用于提高微生物中DHA问题，提供一种提高裂殖壶菌的DHA产量的方法和微生物油脂的制备方法，该方法能够提高裂殖壶菌中DHA的产量。

为了实现上述目的，本发明一方面提供一种提高裂殖壶菌的DHA产量的方法，该方法包括：将裂殖壶菌接种至种子培养基中进行种子培养后得到种子液，将所述种子液以体积比0.5-10%接种至添加有辅助因子的发酵培养基中进行发酵培养；所述辅助因子为N,N-二氧喹恶啉-2-甲醛和/或3-甲基-喹恶啉-2-羧酸，相对于1L的所述发酵培养基，所述辅助因子的添加量为10-200μmol。

优选地，所述种子培养基含有：40-80g/L葡萄糖、1-5g/L KH₂PO₄、25-45g/LNa₂SO₄、2-6g/L MgSO₄、0.5-2g/L KCl、2-8g/L (NH₄)₂SO₄、15-25g/L谷氨酸钠和2-8g/L酵母粉。

优选地，所述发酵培养基含有：60-100g/L葡萄糖、1-5g/L KH₂PO₄、4-12g/LNa₂SO₄、2-6g/L MgSO₄、0.1-1g/L KCl、1-5g/L (NH₄)₂SO₄、4-10g/L NaCl、0.01-0.2g/LCaCl₂、15-25g/L谷氨酸钠、1-5g/L酵母膏和0.5-2.5g/L玉米浆干粉。