[发明专利]一种混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法

权利要求书

1.一种混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

分别对植物乳杆菌、扣囊复膜酵母菌和短小芽孢杆菌活化处理，获得植物乳杆菌种子液、扣囊复膜酵母菌种子液和短小芽孢杆菌种子液；

分别对所述植物乳杆菌种子液、所述扣囊复膜酵母菌种子液和所述短小芽孢杆菌种子液进行离心洗涤后收集沉淀物，再分别分散于灭菌处理的PBS溶液中，对应获得植物乳杆菌菌液、扣囊复膜酵母菌菌液和短小芽孢杆菌菌液；

将所述植物乳杆菌菌液、所述扣囊复膜酵母菌菌液和所述短小芽孢杆菌菌液混合，获得混合菌液；

将蚕豆粉碎过筛获得蚕豆粉，再将所述蚕豆粉和所述混合菌液混合均匀，发酵处理，烘干粉碎，获得混合菌株发酵蚕豆粉。

2.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，将蚕豆粉碎过筛获得蚕豆粉，再将所述蚕豆粉和所述混合菌液混合均匀，发酵处理，烘干粉碎，获得混合菌株发酵蚕豆粉的步骤中，

所述发酵处理的时间为24～78h。

3.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，将蚕豆粉碎过筛获得蚕豆粉，再将所述蚕豆粉和所述混合菌液混合均匀，发酵处理，烘干粉碎，获得混合菌株发酵蚕豆粉的步骤中，

所述发酵处理的温度为28～35℃。

4.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，将蚕豆粉碎过筛获得蚕豆粉，再将所述蚕豆粉和所述混合菌液混合均匀，发酵处理，烘干粉碎，获得混合菌株发酵蚕豆粉的步骤中，

所述发酵处理的湿度为45～55％。

5.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，将蚕豆粉碎过筛获得蚕豆粉，再将所述蚕豆粉和所述混合菌液混合均匀，发酵处理，烘干粉碎，获得混合菌株发酵蚕豆粉的步骤中，

每50g的所述蚕豆粉对应加入50～75mL的所述混合菌液。

6.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，将蚕豆粉碎过筛获得蚕豆粉，再将所述蚕豆粉和所述混合菌液混合均匀，发酵处理，烘干粉碎，获得混合菌株发酵蚕豆粉的步骤中，

所述过筛的筛网筛孔为30～40目。

7.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，将所述植物乳杆菌菌液、所述扣囊复膜酵母菌菌液和所述短小芽孢杆菌菌液，获得混合菌液的步骤中，

所述植物乳杆菌菌液、所述扣囊复膜酵母菌菌液和所述短小芽孢杆菌菌液的体积比为(1～2)：1：1。

8.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，分别离心洗涤后收集沉淀物，并分别分散于灭菌处理的PBS溶液中，分别获得植物乳杆菌菌液、扣囊复膜酵母菌菌液和短小芽孢杆菌菌液的步骤中，

所述植物乳杆菌菌液的含菌浓度为10⁷～10⁹CFU/mL；和/或，

所述扣囊复膜酵母菌菌液的含菌浓度为10⁷～10⁹CFU/mL；和/或，

所述短小芽孢杆菌菌液的含菌浓度为10⁷～10⁹CFU/mL。

9.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，分别离心洗涤后收集沉淀物，并分别分散于灭菌处理的PBS溶液中，分别获得植物乳杆菌菌液、扣囊复膜酵母菌菌液和短小芽孢杆菌菌液的步骤中，

离心的离心力为4000～8000g。

10.如权利要求1所述的混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法，其特征在于，分别对植物乳杆菌、扣囊复膜酵母菌和短小芽孢杆菌活化处理，获得植物乳杆菌种子液、扣囊复膜酵母菌种子液和短小芽孢杆菌种子液的步骤包括：

从固体培养基上挑选植物乳杆菌接种到MRS液体培养基上，培养24～36h，获得植物乳杆菌种子液；

从固体培养基上挑选扣囊复膜酵母菌接种到PDA液体培养基上，培养24～36h，获得扣囊复膜酵母菌种子液；

从固体培养基上挑选短小芽孢杆菌接种到LB液体培养基上，培养24～36h，获得短小芽孢杆菌种子液。