[发明专利]一种壳聚糖亲和蛋白、酶的固定化方法及生物材料有效
| 申请号： | 202210519254.9 | 申请日： | 2022-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN114908071B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 李子杰;高晓冬;李婉杰;许向阳;宋在伟 | 申请（专利权）人： | 江南大学;枣庄市杰诺生物酶有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N15/81;C12N3/00;C12N11/16;C12R1/19;C12R1/865 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 康伟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 聚糖 亲和 蛋白 固定 方法 生物 材料 | ||
1.一种壳聚糖亲和蛋白，其特征在于：所述壳聚糖亲和蛋白为由核苷酸序列SEQ IDNO.1编码的壳聚糖酶经过其氨基酸第54位定点突变而产生的突变体，所述突变体为壳聚糖酶的突变体E54Q。
2.如权利要求1所述的壳聚糖亲和蛋白，其特征在于：所述核苷酸序列SEQ ID NO.1编码的壳聚糖酶来源于Bacillus subtilis 168。
3.一种DNA分子，其特征在于：所述DNA分子编码如权利要求1所述的壳聚糖亲和蛋白。
4.一种质粒载体，其特征在于：所述质粒载体装载了如权利要求3所述的DNA分子。
5.如权利要求4所述的质粒载体，其特征在于：所述质粒载体为大肠杆菌质粒pET-28a或酿酒酵母质粒pRS426。
6.一种酶的固定化方法，其特征在于：包括，
将目的酶基因构建在含有如权利要求1所述的壳聚糖亲和蛋白的表达质粒中，得到重组质粒；
将重组质粒转化到酿酒酵母缺陷型菌株dit1Δ中，得到酵母菌株；
对得到的酵母菌株利用二倍体酵母诱导产孢得到孢子固定化目的酶。
7.如权利要求6所述的酶的固定化方法，其特征在于：所述目的酶基因为α-半乳糖苷酶基因或β-木糖苷酶基因。
8.如权利要求6或7所述的酶的固定化方法，其特征在于：所述表达质粒为酿酒酵母质粒pRS426。
9.如权利要求8所述的酶的固定化方法，其特征在于：还包括对诱导产孢后的孢子进行纯化的方法。
10.一种生物材料，其特征在于：所述生物材料为装载有目的酶和编码如权利要求1所述的壳聚糖亲和蛋白的DNA分子的酿酒酵母孢子；
所述酿酒酵母孢子为酿酒酵母缺陷型菌株dit1Δ的孢子。
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