[发明专利]一种能够稳定传代的脊髓胶质瘤组织块及其冻存和复苏方法有效
申请号: | 202210529969.2 | 申请日: | 2022-05-16 |
公开(公告)号: | CN114634912B | 公开(公告)日: | 2022-08-26 |
发明(设计)人: | 柴睿超;王永志;庞波;贾文清;安崧源;张耀武 | 申请(专利权)人: | 北京市神经外科研究所 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/079;C12Q1/02;A01N1/02;C12R1/91 |
代理公司: | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) 11447 | 代理人: | 耿超 |
地址: | 100070 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 能够 稳定 传代 脊髓 胶质 组织 及其 复苏 方法 | ||
1.一种分离的并且能够连续稳定传代培养的脊髓胶质瘤组织块,其特征在于,所述脊髓胶质瘤组织块的保藏编号为CGMCC No.23030。
2.根据权利要求1所述的脊髓胶质瘤组织块,其中,所述脊髓胶质瘤组织块能够在实验动物体内连续稳定地传代培养。
3.根据权利要求2所述的脊髓胶质瘤组织块,其中,所述实验动物为大鼠或小鼠。
4.权利要求1~3中任意一项所述脊髓胶质瘤组织块的冻存方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
S1、利用磷酸盐缓冲液清洗待冻存的脊髓胶质瘤组织;
S2、将清洗后的脊髓胶质瘤组织剪成组织块,并使用磷酸盐缓冲液再次冲洗所述组织块;
S3、向冲洗后的组织块中加入预冷的冻存液,重悬所述组织块,然后分装至冻存管中;
S4、将步骤S3获得的装有组织块的冻存管依次进行:3-5℃冷藏3-5h,15-25℃冷藏5-7h,零下70~零下90℃冷冻7-9h,最后在液氮中冷冻保存。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,步骤S3中所述预冷的冻存液的体积为所述组织块体积的10-20倍。
6.根据权利要求4所述的方法,其中,所述组织块的长度为1-3mm,截面积为1-6平方毫米。
7.根据权利要求4所述的方法,其中,步骤S3中所述预冷的冻存液包括含8-12体积%的二甲基亚砜的胎牛血清冻存液。
8.一种脊髓胶质瘤组织块的复苏方法,其特征在于,该方法包括:
将权利要求4~7中任意一项所述的方法冻存得到的脊髓胶质瘤组织块从液氮中取出,放置在35-38℃的水浴中解冻至融化,然后加入生理盐水混匀,再离心去掉上清液,得到复苏后的脊髓胶质瘤组织块。
9.权利要求1~3中任意一项所述的脊髓胶质瘤组织块在筛选治疗脊髓胶质瘤药物中的用途。
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