[发明专利]用于BCR/TCR基因重排检测的试剂盒和装置有效
申请号: | 202210532220.3 | 申请日: | 2022-05-17 |
公开(公告)号: | CN114657254B | 公开(公告)日: | 2022-08-23 |
发明(设计)人: | 王维锋;蔡佳程;张科;武海燕;郑新;李锋 | 申请(专利权)人: | 至本医疗科技(上海)有限公司;上海至本医学检验所有限公司;至本医疗科技(重庆)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/686;C40B50/06;C12N15/11;G16B30/00 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 陈春渠 |
地址: | 200000 上海市浦东新区中国*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 bcr tcr 基因 重排 检测 试剂盒 装置 | ||
1.一种用于BCR/TCR基因重排检测的引物组合产品,其特征在于,包括:用于检测BCR基因重排的引物和/或用于检测TCR基因重排的引物;
所述用于检测BCR基因重排的引物包括用于检测IGH-VDJ重排、IGH-DJ重排、IGK-VJ重排、IGK-V-KDE重排、IGK-intronRSS-KDE重排、IGL-VJ重排、BCL1-IGH重排以及BCL2-IGH重排的引物组合物;
所述用于检测TCR基因重排的引物包括用于检测TRB-VDJ重排和TRG-VJ重排的引物组合物;
其中,用于检测IGH-VDJ重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:1-22所示的上游引物,以及如SEQ ID NO:23-26所示的下游引物;
用于检测IGH-DJ重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:27-34所示的上游引物,以及如SEQ ID NO:23-26所示的下游引物;
用于检测IGK-VJ重排、IGK-V-KDE重排和IGK-intronRSS-KDE重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:35-46所示的上游引物,以及如SEQ ID NO:47-50所示的下游引物;
用于检测IGL-VJ重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:51-52所示的上游引物序列,以及如SEQ ID NO:53所示的下游引物;
用于检测BCL1-IGH重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:54所示的上游引物,以及如SEQ ID NO:55所示的下游引物;
用于检测BCL2-IGH重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:56-64所示的上游引物,以及包括如SEQ ID NO:55所示的下游引物;
用于TRB-VDJ重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:65-116所示的上游引物,以及如SEQID NO:117-129所示的下游引物;
用于TRG-VJ重排的引物组合物包括如SEQ ID NO:130-135所示的上游引物,以及如SEQID NO:136-139所示的下游引物;
所述引物组合产品还包括内参引物,所述内参引物扩增的目的片段位于内参基因上。
2.根据权利要求1所述的引物组合产品,其特征在于,所述内参引物扩增的目的片段位于内参基因ACTB上。
3.根据权利要求2所述的引物组合产品,其特征在于,所述内参引物包括如SEQ ID NO:140所示的上游引物,以及如SEQ ID NO:141所示的下游引物。
4.根据权利要求1~3任一项所述的引物组合产品,其特征在于,所述引物组合产品还包括测序接头,所述测序接头的核苷酸序列包括如SEQ ID NO:142所示的上游引物固定序列,以及如SEQ ID NO:143所示的下游引物固定序列。
5.根据权利要求4所述的引物组合产品,其特征在于,所述测序接头还包括第一标签序列和第二标签序列,所述上游引物固定序列连接有第一标签序列,所述下游引物固定序列连接有第二标签序列。
6.一种含有权利要求1~5任一项所述的引物组合产品的试剂盒。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR扩增试剂,所述PCR扩增试剂包括扩增酶、扩增缓冲液以及无核酸酶水中的至少一种。
8.一种用于BCR/TCR基因重排检测的测序文库建库方法,其特征在于,包括:
采用权利要求1~5任一项所述的引物组合产品或权利要求6或7所述的试剂盒,对受试者的DNA进行多重PCR扩增,构建用于BCR/TCR基因重排检测的高通量测序文库。
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