[发明专利]用于BCR/TCR基因重排检测的试剂盒和装置

说明书

本发明涉及一种用于BCR/TCR基因重排检测的引物组合产品，包括：用于检测BCR基因重排的引物和/或用于检测TCR基因重排的引物；用于检测BCR基因重排的引物包括用于检测IGH‑VDJ重排、IGH‑DJ重排、IGK‑VJ重排、IGK‑V‑KDE重排、intronRSS‑KDE重排、IGL‑VJ重排、BCL1‑IGH重排以及BCL2‑IGH重排的引物组合物；用于检测TCR基因重排的引物包括用于检测TRB‑VDJ重排和TRG‑VJ重排的引物组合物。本发明的试剂盒，能够通过一管多重PCR进行9种不同类型的基因重排检测，具有操作步骤难度低、标准化程度高的优点，从而减少假阴性检测。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，具体而言，涉及一种用于BCR/TCR基因重排检测的试剂盒和装置。

背景技术

免疫细胞针对纷繁复杂的入侵的病原体（抗原）的免疫反应，依赖于其高度多样性的抗原识别受体B细胞表面受体（B cell receptor, BCR）和T细胞表面受体（T cellreceptor, TCR）。

B细胞表面受体（BCR）是一种长在B淋巴细胞表面的免疫球蛋白分子IG，由两条重链（H）和两条轻链（，）通过二硫键连接而成，编码重链和轻链的基因编码并不在同一条染色体上，编码重链H的基因IGH位于14号染色体长臂，编码轻链的基因IGK位于2号染色体短臂，编码轻链的基因IGL位于22号染色体长臂。

其中，重链分为可变区(Variable regions, V区)、恒定区(Constant regions，C区)、跨膜区及胞质区，而轻链则只有V区和C区。在可变区里面，还有变化相对小的4个骨架区（FR1/FR2/FR3/FR4），变化相对大的3个互补决定区（CDR1/CDR2/CDR3），其中变化最大的是CDR3区。

编码重链可变区的胚系基因分为V、D、J三种基因片段，其中，V基因片段有44个，D基因片段有27个，J基因片段有6个，V、D、J三个基因片段重叠部分在CDR3区域。在基因发生重排的时候，B细胞（生理或病理状态下），分别从V、D、J基因片段中各挑1个，组成V-D-J耦合基因，约有7000多种组合。编码轻链可变区的胚系基因则分为V和J两个基因片段。

具体地，V、J基因片段在个体胚系基因组上相互远离，但在B细胞内，通过重排，原来相互远离的V和J基因区段接合产生了连续的外显子，其编码整个轻链V区。进一步在转录后，通过RNA剪接将V区外显子连接到C区外显子上，构成完整的轻链mRNA，进一步可以表达为轻链蛋白。将D基因片段连接到J基因片段形成DJ片段，然后一个V基因片段重排至DJ片段，形成一个完整的重链V区外显子。然后与轻链基因一样，RNA剪接将组装的重链V区序列连接到邻近的C区序列形成完整的mRNA，进一步可以表达为重链蛋白。

TCR-类似BCR轻链编码基因，含有V和J基因片段（V和J）。TCR-类似BCR重链编码基因，除V和J基因片段外，还含有D片段。同样的，也是经历通过DNA重组和mRNA剪切两个步骤，完成了不同类别的TCR序列的表达。

正常人的机体时刻在应对各种各样内源性或外源性的抗原，不管是BCR还是TCR都应该是多克隆的，单克隆往往意味着机体处于病理状态。BCR基因检测到单克隆重排往往提示B淋巴细胞系的肿瘤如CLL、MM、B细胞淋巴瘤、B-ALL等。TCR基因的单克隆重排往往提示T淋巴细胞系的肿瘤如T-ALL、T细胞淋巴瘤等。

B/T细胞表面受体（BCR/TCR）克隆重排作为淋系血液肿瘤的诊断标志物和微小残留病灶（MRD）追踪标志物，已用于指导急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）和多发性骨髓瘤（MM）的治疗决策。