[发明专利]一种基于抗污染比色拭子用于食品复杂基质中沙门氏菌的快速检测方法

说明书

本发明提供了一种基于抗污染比色拭子用于食品复杂基质中沙门氏菌的快速检测方法，包括：(1)抗污染棉签拭子制备体系，(2)抗污染比色拭子检测分析体系。本发明对两性离子抗污染性能进行验证，利用光引发聚合法在棉签拭子表面接枝两性离子，对棉签拭子改性前后进行表征验证以及抗污染性能测定，在实际食品基质样本中验证了两性离子改性棉签拭子的可行性和改性后棉签拭子的抗污染特性。本发明以抗污染比色拭子为终端检测平台，蓝色乳胶微球/适配体作为比色信号探针，配合便携式色差仪配合智能手机得到定量检测结果，实现了无需样品前处理即可定量检测牛奶中的沙门氏菌。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于抗污染比色拭子用于食品复杂基质中沙门氏菌的快速检测方法。

背景技术

沙门氏菌是食源性传染病的主要原因之一，极易污染肉、蛋、奶等食品，通常当沙门氏菌只有一个菌落单位形成时，即可引起人类感染，其致病限度极低、传播力强、防控难度大，对公众健康构成严重威胁。由于平板计数法和实时聚合酶链反应的传统方法既费时又费力，因此迫切需要新的快速检测方法用于现场和在线应用。生物传感器作为一种简便、灵敏、低成本的分析手段,为食品安全快速检测特别是病原体、蛋白质、重金属及抗生素等，提供了有效的保障。

棉签拭子作为一种易获得、易改性、成本低的快速检测元件，已被广泛应用于样品采集、靶标富集和定量检测中。但是,在检测复杂样品过程中往往存在基质的干扰,导致生物传感器的检测灵敏度和结果科学性受到了影响。近年来,采用两性离子抗污染材料改性生物传感器的研究受到越来越多的关注。为了抵抗复杂样品中的基质干扰,提高传感器的检测灵敏度和特异性,保障最终检测结果的科学性和可靠性，抗污染生物传感器在快速检测领域的开发和应用显得尤为重要。迄今为止，两性离子改性的生物传感器已被用于快速检测领域，但尚未有关于两性离子改性棉签拭子检测沙门氏菌的报道。

发明内容

本发明的目的是开发一种基于抗污染比色拭子用于食品复杂基质中沙门氏菌的快速检测方法。

为了实现本发明目的，设计了抗污染棉签拭子，构建了抗污染比色拭子检测平台，“蓝色乳胶微球/适配体”为比色信号探针，配合便携式色差仪和智能手机的信号读取设备，实现对牛奶中沙门氏菌的定性定量快速检测。

一方面，本发明提供一种基于抗污染比色拭子用于食品复杂基质中沙门氏菌的快速检测方法，包括：(1)抗污染棉签拭子制备体系，(2)抗污染比色拭子检测分析体系：

所述抗污染棉签拭子制备体系是指两性离子材料和沙门氏菌特异性适配体序列通过光引发聚合法和浸没法表面改性商用棉签；

优选地，抗污染材料聚甲基丙烯酸磺基甜菜碱(SBMA)

所述SBMA为强亲水性、强防污性的两性离子抗污染化学材料；

所述沙门氏菌特异性适配体序列用来特异性捕获沙门氏菌实现检测；

所述光引发聚合发为利用紫外辐照和光引发剂实现聚合反应；

所述浸没法为利用浸润孵育的方式实现聚合物间的物理吸附；

所述抗污染比色拭子检测分析体系包括抗污染棉签、蓝色乳胶微球/适配体、色差仪以及智能手机；

所述蓝色乳胶微球/适配体为检测体系中的信号探针；

所述信号探针为蓝色乳胶微球与适配体共价偶联的聚合物。

另一方面，本发明提供沙门氏菌快速检测方法用到的抗污染棉签拭子制备材料，包括，SBMA、适配体和商用棉签；

所述SBMA与棉签拭子由紫外辐照和光引发剂实现光引发聚合；

优选地，紫外辐照波长365nm、紫外辐照时间20min；

优选地，光引发剂Irgacure2595；