[发明专利]一种小分子药物与siRNA共输送的小粒径纳米体系的构建方法及应用

说明书

本发明属于高分子化学与生物医学工程领域，公开了一种小分子药物与siRNA共输送的小粒径纳米体系的构建方法及应用。本发明中的聚合物在中性条件下可以自组装，并将小分子药物负载于胶束核，亚表层复合siRNA，得到尺寸较小的纳米药物，可有效被动靶向胰腺星状细胞。载体携带的CXCL12siRNA，可以抑制CXCL12的表达，进而抑制肿瘤相关巨噬细胞，髓源性抑制细胞，调节性T细胞等免疫抑制细胞的募集，同时增加细胞毒性T细胞在肿瘤部位的的浸润，输送的小分子药物钙泊三醇可以抑制胰腺星状细胞的活化，抑制胰腺癌组织致密的胞外基质生成，改善肿瘤微环境，进而联合PD‑1抗体，达到增强胰腺癌免疫治疗效果的作用。

技术领域

本发明涉及高分子化学与生物医学工程领域，具体涉及一种小分子药物与siRNA共输送的小粒径纳米体系的构建方法及应用。

技术背景

目前，用于胰腺癌系统治疗的药物主要包括吉西他滨，紫杉醇类，伊立替康，氟尿嘧啶类，奥沙利铂类等化疗药物，以及靶向药物厄洛替尼和尼妥珠单抗。然而由于胰腺癌特有的肿瘤微环境，限制了药物治疗作用的发挥，也导致胰腺癌患者对治疗的不敏感及预后效果差。

胰腺癌的肿瘤微环境主要由胰腺癌细胞及其周围的成纤维细胞、免疫细胞、血管内皮细胞、细胞外基质、细胞因子等成分构成。致密的细胞外基质可以形成物理屏障，阻碍药物输送至肿瘤部位；同时肿瘤相关巨噬细胞，髓源性抑制细胞，调节性T细胞等免疫抑制细胞在肿瘤部位的聚集也可以抑制肿瘤的免疫响应。因此，从肿瘤微环境的角度出发，寻找新的治疗策略，对于提高胰腺癌的治疗效果具有非常重要的意义。胰腺星状细胞是胰腺癌肿瘤微环境的重要组成部分，在细胞因子的刺激下，胰腺星状细胞可发生活化，大量增殖，并通过分泌细胞外基质、细胞因子等方式促进胰腺癌的生长。一方面，它分泌的细胞外基质可以形成物理屏障阻碍药物输送及效应T细胞的浸润；另一方面，它分泌的细胞因子不仅可直接作用于肿瘤细胞，促进肿瘤细胞的增殖与转移，还可作用于免疫细胞，诱导形成免疫抑制的肿瘤微环境。所以，胰腺星状细胞可作为胰腺癌治疗的一个重要靶点。

趋化因子12(CXCL12)，又称基质细胞衍生因子1(SDF-1)，是一种小分子细胞因子，属于趋化因子蛋白家族。研究报道表明，在胰腺癌发展过程中，趋化因子12(CXCL12)主要由胰腺星状细胞分泌，并参与形成免疫抑制的肿瘤微环境。CXCL12通过作用于肿瘤细胞、T细胞、单核细胞、血管内皮细胞表面的CXCR4受体，进而促进肿瘤的生长与转移，抑制细胞毒性T细胞在肿瘤部位的的浸润，并募集抑制性免疫细胞如到肿瘤微环境，介导免疫抑制的肿瘤微环境。因此，抑制CXCL12信号通路也可以改善胰腺癌的肿瘤微环境。近年来，RNA干扰技术得到了很大的发展，因其具有高效的基因沉默效果，在包括肿瘤在内的多种疾病的治疗领域展现出了非常广阔的应用前景。利用RNA干扰技术下调胰腺星状细胞的CXCL12的表达，可以减少免疫抑制细胞的募集，并增加细胞毒性T细胞的聚集，可达到改善胰腺癌肿瘤微环境的作用。此外，研究报道小分子药物钙泊三醇逆转胰腺星状细胞的活化，在减少胰腺星状细胞细胞外基质分泌的同时，也可抑制CXCL12的分泌。所以CXCL12小干扰RNA与小分子药物钙泊三醇联合使用可达到协同改善胰腺癌肿瘤微环境的作用，在此基础上联合免疫抑制剂PD-1，可达到增强胰腺癌免疫治疗的效果。

近年来，聚合物纳米载体的发展为降低药物毒副作用及药物共输送方面展现出巨大的潜力，然而，受限于胰腺癌致密的基质微环境，目前报道的小分子与siRNA共载体系100nm左右的尺寸无法在肿瘤部位有效渗透。因此，如何让共载的siRNA和小分子药物在胰腺癌组织富集并发挥抗肿瘤作用，也是临床上亟需解决的一个重要问题。

发明内容

本发明的目的在于制备一种聚合物载体共载钙泊三醇和CXCL12-siRNA的小粒径的纳米药物，克服由于胰腺癌肿瘤微环境中致密的胞外基质引起的药物及效应T细胞渗透阻碍。

本发明的另一个目的在于提供一种小分子药物与核酸药物共递送的载体聚合物。

本发明的另一个目的在于提供一种上述载体聚合物的制备方法。