[发明专利]一种根瘤菌的双基因突变体及其应用

权利要求书

1.一种根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HH103的双基因突变体，其特征在于，所述双基因突变体是以根瘤菌为出发菌，将出发菌株中的NopT基因和NopP基因进行突变或者沉默获得的；所述NopP基因的序列如SEQ ID NO.2所示；NopT基因的登录号为Glyma03g06640。

2.一种减少大豆根瘤数目的试剂，其特征在于，所述试剂的有效成分是权利要求1所述的根瘤菌HH103的双基因突变体。

3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，将权利要求2所述的试剂接种过表达GmPBS1基因的大豆幼苗或者野生型大豆幼苗。

4.一种减少大豆根瘤的方法，其特征在于，在大豆幼苗或过表达GmPBS1基因的大豆幼苗生长至对生真叶期，对大豆苗施用含权利要求1所述的双基因突变体的菌液，接菌数量为大于2×10⁵个/株，培育接种菌液后的大豆30-40天，所述方法适用的大豆品种为绥农14或野生豆ZYD00006。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述菌液按如下方法制备：

（1）将权利要求1所述的双基因突变体培养活化，控制OD600为0.65-0.86；

（2）将步骤（1）得到的菌液离心，收集菌体并洗涤，再用硫酸镁溶液重悬菌体，使菌液OD600达到0.2，所述方法适用的大豆品种为绥农14或野生豆ZYD00006。