[发明专利]一种间充质干细胞及其制备方法在审
申请号: | 202210544372.5 | 申请日: | 2022-05-19 |
公开(公告)号: | CN114703145A | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 梅景顺;刘超;郑兵;曹玉福;荣大千 | 申请(专利权)人: | 山东灵犀生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N5/0775;C12N15/113 |
代理公司: | 淄博佳和专利代理事务所(普通合伙) 37223 | 代理人: | 张雯 |
地址: | 250000 山东省济南市中国(山东)自由贸易试验区*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 间充质 干细胞 及其 制备 方法 | ||
1.一种间充质干细胞,其特征在于:所述的间充质干细胞内转染miR-210。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞,其特征在于:所述的间充质干细胞为人源脂肪间充质干细胞。
3.一种权利要求1或2所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于:取培养至第四代的间充质干细胞接种至孔板,待融合度生长至80~90%时,进行miR-210 mimics的转染。
4.根据权利要求3所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于:所述的间充质干细胞培养方法为:含有间充质干细胞的人脂肪经冲洗和细胞筛网过滤获得间充质干细胞,加入含胎牛血清的L-DMEM培养基,移入培养皿进行原代培养,去除非贴壁细胞并用PBS缓冲液洗瓶,重新添加新鲜原代培养液,培养至细胞达80%~90%融合时,加入胰酶消化,按1: 2比例传代培养。
5.根据权利要求4所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于:所述的含有间充质细胞的人脂肪用含青霉素与链霉素的PBS冲洗1~5次后,加入等体积0.075%Ⅰ型胶原酶,37℃,消化30 min,每5分钟混匀摇动;6. 悬液经PBS洗涤两次后,1500 r/min离心10 min,PBS重悬经70 μm细胞筛网过滤。
6.根据权利要求4所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于:所述的胎牛血清在L-DMEM培养基中的体积分数为10%。
7.根据权利要求6所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于:所述的添加新鲜原代培养液后,置于37℃、5% 二氧化碳浓度培养箱内,每3天更换一次培养液,进行培养。
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