[发明专利]一种间充质干细胞及其制备方法

说明书

一种间充质干细胞及其制备方法，属于间充质干细胞迁移能力提升方法技术领域。现有技术中，移植后的MSCs真正有效迁移至损伤或肿瘤部位的数量极少，从而严重影响了受损部位及肿瘤的修复效果，成为MSCs临床移植中的最大瓶颈。本发明的间充质干细胞来源于正常脂肪组织，体外培养操作流程规范，获得的间充质干细胞形态均一，且符合细胞表面流式鉴定。对上述获取的间充质干细胞通过转染miR‑210，促进了c‑Met高表达，使MSCs在体外向HGF诱导的迁移能力更强，体内向骨组织损伤部位迁移效果更佳，由此，得到了一种具备高迁移能力的间充质干细胞。

技术领域

一种间充质干细胞及其制备方法，属于间充质干细胞迁移能力提升方法技术领域。

背景技术

间充质干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）作为一种颇具前景的种子细胞，已被广泛应用于自体细胞移植。临床应用MSCs的早期想法是源于对神经系统的保护，并已用于治疗神经性损伤疾病方面的应用。不仅如此，基于MSCs向多种类型细胞分化的潜能，可以广泛应用于多种损伤组织器官（心肌、软骨、脊髓等）的修复及再生。MSCs的定向迁移对于机体内许多器官的发育和再生，以及组织损伤后的修复是必需的。许多报道发现移植的MSCs对于机体的病灶部位会产生明显的趋化迁移效应。机体组织受损后其修复能力是有限的。因此，将具有多方向分化能力的间充质干细胞进行临床移植对于器官组织再生具有重大的意义。基于目前临床上的多数研究，发现移植后的MSCs真正有效迁移至损伤或肿瘤部位的数量极少，从而严重影响了受损部位及肿瘤的修复效果，成为MSCs临床移植中的最大瓶颈。

现有技术中，专利CN 201911163143.3公开了一种靶向间充质干细胞药物递送系统的制备方法，其通过向MSCs细胞中转染miR-26b提高其迁移能力，其实际着重提高的仍是MSCs迁移后在靶向位置的定植能力，仍然不能有效的提高MSCs向目标位置的迁移能力。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供一种具备高迁移能力的间充质干细胞及其制备方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种间充质干细胞，其特征在于：所述的间充质干细胞内转染miR-210。

对病灶部位的趋化性迁移是由受损部位所分泌出的血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor, VEGF）、干细胞生长因子（stem cell factor, SCF）、基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1, SDF-1）以及肝细胞生长因子（hepotacyte growth factor, HGF）等细胞因子所诱导引起的。发明人通过大量试验发现，在众多诱导因子中，HGF才是引起间充质干细胞最佳迁移效应的因子。在此基础上，发明人经过研究进一步发现，通过抑制剂SU11274将c-Met活性抑制后，处理后的细胞向HGF的迁移数目明显减少，这充分证明了c-Met介导了HGF诱导的MSCs的迁移效应，c-Met的磷酸化水平与HGF诱导的迁移成正相关性。

为了充分利用上述发现中HGF对诱导迁移的影响，同时也为了获得最佳迁移效率的MSCs，发明人尝试多种活性促进物质与HGF、c-Met之间的关系，以及MicroRNA家族中多种MicroRNA对HGF、c-Met影响，经过对不同MicroRNA转染试验，发明人发现miR-210作为MicroRNA家族中的一个小分子RNA，可以影响肿瘤迁徙，也可以调控Met表达，由此，上述技术方案通过向MSCs中转染miR-210，的确上调了细胞内c-Met的活化水平，且转染后的细胞向HGF的迁移数量明显增加。并且经过构造软骨损伤模型，发现注射转染miR-210的MSCs迁移至体内病灶部位的细胞数显著性地大于未转染组，进一步验证了，通过miR-210转染间充质干细胞最终能够获得一类具备高效趋化迁移能力的MSCs。