[发明专利]邻近碱基对增强型脱氧核酶和生物传感及生物传感器的应用在审
申请号: | 202210544494.4 | 申请日: | 2022-05-18 |
公开(公告)号: | CN114703192A | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 李旺;苏志鹏;任佳丽 | 申请(专利权)人: | 中南林业科技大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12Q1/689;C12Q1/682;C12N15/115;C12N15/11;C12R1/19 |
代理公司: | 长沙心智力知识产权代理事务所(普通合伙) 43233 | 代理人: | 张洪敏 |
地址: | 410004 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 邻近 碱基对 增强 脱氧 生物 传感 传感器 应用 | ||
1.一种邻近碱基对增强型脱氧核酶,其特征在于,所述增强型脱氧核酶的核苷酸序列G4-AA、G4-AG、G4-A-MdA、G4-A-AP、G4-A-dI中的一种;
所述G4-AA的核苷酸序列为:G4-AA-TTTCGCTATGTCTG;
所述G4-AG的核苷酸序列为:G4-AG-TTTCGCTATGTCTG;
其中G4-A-MdA的核苷酸序列为:G4-A-/6-med a/-TTTCGCTATGTCTG;
G4-A-AP的核苷酸序列G4-A-/i2-amp/-TTTCGCTATGTCTG;
G4-A-dI的核苷酸序列G4-A-/6-ide oxy i/-TTTCGCTATGTCTG。
2.根据权利要求1所述的邻近碱基对增强型脱氧核酶,其特征在于,所述G4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种生物传感器,其特征在于,包括权利要求1或2所述的邻近碱基对增强型脱氧核酶、互补DNA链、大肠杆菌适配体和氯铁血红素。
4.根据权利要求3所述的生物传感器,其特征在于,所述互补DNA链为cDNA,
cDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.根据权利要求3所述的生物传感器,其特征在于,所述大肠杆菌适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
6.根据权利要求3至5种任一项所述的生物传感器,其特征在于,所述生物传感器还包MES缓冲液体系、ABTS2-和H2O2。
7.根据权利要求6所述的生物传感器,其特征在于,所述增强型脱氧核酶的浓度为200nM:所述互补DNA链的浓度为400nM,所述氯铁血红素的浓度为200nM;所述ABTS2-的浓度为1mM;所述H2O2的浓度为2mM。
8.一种权利要求3至7中任一项所述生物传感器在检测大肠杆菌中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用的方法为:
(1)取待测液体添加到含有大肠杆菌适配体的MES缓冲液中孵化得到体系一;
(2)往所述体系一中加入权利要求1或2所述的邻近碱基对增强型脱氧核酶、氯铁血红素和互补DNA链孵化,得到体系二;
(3)将所述体系二转入石英比色皿中,加入H2O2和ABTS2-,摇匀得到体系三;
(4)紫外分光光度计测取体系三的420nm处吸光度变化值。
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