[发明专利]邻近碱基对增强型脱氧核酶和生物传感及生物传感器的应用在审

专利信息
申请号: 202210544494.4 申请日: 2022-05-18
公开(公告)号: CN114703192A 公开(公告)日: 2022-07-05
发明(设计)人: 李旺;苏志鹏;任佳丽 申请(专利权)人: 中南林业科技大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12Q1/689;C12Q1/682;C12N15/115;C12N15/11;C12R1/19
代理公司: 长沙心智力知识产权代理事务所(普通合伙) 43233 代理人: 张洪敏
地址: 410004 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 邻近 碱基对 增强 脱氧 生物 传感 传感器 应用
【权利要求书】:

1.一种邻近碱基对增强型脱氧核酶,其特征在于,所述增强型脱氧核酶的核苷酸序列G4-AA、G4-AG、G4-A-MdA、G4-A-AP、G4-A-dI中的一种;

所述G4-AA的核苷酸序列为:G4-AA-TTTCGCTATGTCTG;

所述G4-AG的核苷酸序列为:G4-AG-TTTCGCTATGTCTG;

其中G4-A-MdA的核苷酸序列为:G4-A-/6-med a/-TTTCGCTATGTCTG;

G4-A-AP的核苷酸序列G4-A-/i2-amp/-TTTCGCTATGTCTG;

G4-A-dI的核苷酸序列G4-A-/6-ide oxy i/-TTTCGCTATGTCTG。

2.根据权利要求1所述的邻近碱基对增强型脱氧核酶,其特征在于,所述G4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种生物传感器,其特征在于,包括权利要求1或2所述的邻近碱基对增强型脱氧核酶、互补DNA链、大肠杆菌适配体和氯铁血红素。

4.根据权利要求3所述的生物传感器,其特征在于,所述互补DNA链为cDNA,

cDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根据权利要求3所述的生物传感器,其特征在于,所述大肠杆菌适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

6.根据权利要求3至5种任一项所述的生物传感器,其特征在于,所述生物传感器还包MES缓冲液体系、ABTS2-和H2O2

7.根据权利要求6所述的生物传感器,其特征在于,所述增强型脱氧核酶的浓度为200nM:所述互补DNA链的浓度为400nM,所述氯铁血红素的浓度为200nM;所述ABTS2-的浓度为1mM;所述H2O2的浓度为2mM。

8.一种权利要求3至7中任一项所述生物传感器在检测大肠杆菌中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用的方法为:

(1)取待测液体添加到含有大肠杆菌适配体的MES缓冲液中孵化得到体系一;

(2)往所述体系一中加入权利要求1或2所述的邻近碱基对增强型脱氧核酶、氯铁血红素和互补DNA链孵化,得到体系二;

(3)将所述体系二转入石英比色皿中,加入H2O2和ABTS2-,摇匀得到体系三;

(4)紫外分光光度计测取体系三的420nm处吸光度变化值。

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