[发明专利]一种表达微菌素Y的枯草芽孢杆菌工程菌株及其制备和应用

权利要求书

1.用于在枯草芽孢杆菌中表达微菌素Y的多核苷酸，其特征在于：所述多核苷酸为核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的mcyABCD改造基因。

2.一种重组质粒，所述重组质粒包含如权利要求1所述的多核苷酸。

3.根据权利要求2所述的重组质粒，其特征在于：所述重组质粒为PHT43-mcyABCD，是将mcyABCD改造基因插入到PHT43质粒中构建所得。

4.一种工程菌，所述工程菌包含如权利要求2或3所述的重组质粒。

5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌为枯草芽孢杆菌工程菌株，是将重组质粒PHT43-mcyABCD转入枯草芽孢杆菌中制备所得。

6.一种药物制剂，包含权利要求5所述的工程菌。

7.一种微菌素Y的枯草芽孢杆菌表达系统，其特征在于：将权利要求3所述的重组质粒PHT43-mcyABCD转入枯草芽孢杆菌中，然后进行诱导表达。

8.如权利要求7所述的枯草芽孢杆菌表达系统的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、设计携带对应同源臂的引物，分别扩增PHT43线性化片段、mcyA和mcyBCD片段并引入SD和起始密码子序列，然后进行多片段连接和环化，构建PHT43-mcyABCD重组质粒；

步骤二、将步骤一构建的PHT43-mcyABCD重组质粒转入到大肠杆菌中进行阳性验证；

步骤三、将经步骤二验证的PHT43-mcyABCD重组质粒转化到枯草芽孢杆菌中，利用IPTG进行诱导表达制备微菌素Y。

9.如权利要求5所述的工程菌或权利要求7所述的枯草芽孢杆菌表达系统在制备微菌素Y或包含微菌素Y的抑菌制剂中的应用。