[发明专利]金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

权利要求书

1.金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备不同供试品溶液；

(2)制备对照品混合溶液：精密称取荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素对照品适量，用体积百分含量为30％～100％甲醇溶液配制成每1mL分别含10～80μg荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、10～80μg荭草苷、5～50μg牡荆苷、5～50μg槲皮素的对照品混合溶液；

(3)采用HPLC分别对不同供试品溶液及对照品混合溶液进行进样分析，记录不同供试品溶液HPLC指纹图谱及混合对照品溶液HPLC指纹图谱，以其中1个批次的供试品溶液HPLC指纹图谱作为参照图谱，设置时间窗宽度设为0.1min，采用中位数矢量法计算，经多点校正、数据匹配，生成对照指纹图谱(R)；

(4)通过比对对照品混合溶液HPLC指纹图谱和对照指纹图谱(R)中各色谱峰的出峰时间，确认有22个共有峰，并指认出：2号峰为荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、4号峰为荭草苷、8号峰为牡荆苷、17号峰为槲皮素；

(5)以荭草苷作为参照峰，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对不同批次供试品溶液HPLC指纹图谱与对照指纹图谱(R)进行相似度计算分析。

2.根据权利要求1所述的金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液通过以下方法制得：精密量取金莲花口服液3～10mL于100mL容量瓶中，加入体积百分含量为30％～100％甲醇溶液50～100mL，超声处理5～30min，超声功率400W，超声频率40W，放冷至室温，定容，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取10mL续滤液于25mL容量瓶中，加入体积百分含量为30％～100％甲醇溶液稀释定容至刻度，摇匀，过0.45μm有机微孔滤膜。

3.根据权利要求2所述的金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述供试品溶液通过以下方法制得：精密量取供试品5mL于100mL量瓶中，加入甲醇80mL，超声处理10min，超声功率400W，超声频率40kHz，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10mL于25mL量瓶中，加体积百分含量为50％甲醇溶液至刻度，摇匀，过0.45μm有机微孔滤膜滤过。

4.根据权利要求1所述的金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述供试品溶液中的供试品为金莲花口服液或提取浓缩液。

5.根据权利要求1所述的金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中，所述混合对照品混合溶液通过以下方法制得：精密称取荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素对照品适量，用体积百分含量为50％甲醇溶液配制成每1mL分别含50μg荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、60μg荭草苷、18μg牡荆苷、5μg槲皮素的对照品混合溶液。