[发明专利]金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开了金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：(1)制备不同供试品溶液；(2)制备混合对照品溶液；(3)采用HPLC进样分析，生成对照指纹图谱(R)；(4)确认有22个共有色谱峰，并指认出：2号峰为荭草素‑2″‑O‑β‑L‑半乳糖苷、4号峰为荭草苷、8号峰为牡荆苷、17号峰为槲皮素；(4)利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度分析。本发明稳定性高，准确性与重复性好，能较全面的反映金莲花口服液的质量信息，可用于金莲花口服液的生产过程监控和制剂质量的控制。

技术领域

本发明涉及中药指纹图谱建立技术领域，尤其是涉及金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

背景技术

金莲花口服液是由金莲花单味药材组成的制剂，用于风热邪毒袭肺，热毒内盛引起的上呼吸道感染、咽炎、扁桃体炎。现收载于《中国药典》2020年版一部。

药品的质量是保证临床用药安全有效的前提，目前《中国药典》中用来评价金莲花口服液制剂质量的方法是以荭草苷为指标进行控制，但是金莲花口服液成分复杂，仅靠单一成分的含量测量并不能对金莲花口服液的质量进行整体描述与评价，难以有效反映金莲花口服液的整体质量。

中药指纹图谱作为一种综合的可量化的鉴定手段，其信息量大、特征性强、整体性、模糊性等特点能全面地反映中药所含化学成分的种类和数量，目前已成为符合中药特点的质量控制模式之一，并在中药制剂质量控制上的应用愈加广泛。

目前，国内外尚未见有关于金莲花口服液指纹图谱建立的专利及文献报道。

发明内容

本发明是为了提供一种稳定性高，准确性与重复性好的金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，能较全面的反映金莲花口服液的质量信息，可用于金莲花口服液的生产过程监控和制剂质量的控制，从而保证产品质量均一稳定，保证临床用药的安全性和有效性。

本发明还提供了一种金莲花口服液HPLC指纹图谱。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：本发明的金莲花口服液HPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

(1)制备不同供试品溶液。

(2)制备对照品混合溶液：精密称取荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素对照品适量，用体积百分含量为30％～100％甲醇溶液配制成每1mL分别含10～80μg荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、10～80μg荭草苷、5～50μg牡荆苷、5～50μg槲皮素的对照品混合溶液。(3)采用HPLC分别对不同供试品溶液及对照品混合溶液进行进样分析，记录不同供试品溶液HPLC指纹图谱及混合对照品溶液HPLC指纹图谱，以其中1个批次的供试品溶液HPLC指纹图谱作为参照图谱，设置时间窗宽度设为0.1min，采用中位数矢量法计算，经多点校正、数据匹配，生成对照指纹图谱(R)。

(4)通过比对对照品混合溶液HPLC指纹图谱和对照指纹图谱(R)中各色谱峰的出峰时间，确认有22个共有峰，并指认出：2号峰为荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、4号峰为荭草苷、8号峰为牡荆苷、17号峰为槲皮素。

(5)以荭草苷作为参照峰，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对不同批次供试品溶液HPLC指纹图谱与对照指纹图谱(R)进行相似度计算分析。本申请中采用的中药色谱指纹图谱相似度评价系统采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)；4号峰荭草苷分离度好，峰面积较大且保留时间适中，故以荭草苷为参照峰。

作为优选，步骤(1)中，所述供试品溶液通过以下方法制得：精密量取金莲花口服液3～10mL于100mL容量瓶中，加入体积百分含量为30％～100％甲醇溶液50～100mL，超声处理5～30min，超声功率400W，超声频率40W，放冷至室温，定容，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取10mL续滤液于25mL容量瓶中，加入体积百分含量为30％～100％甲醇溶液稀释定容至刻度，摇匀，过0.45μm有机微孔滤膜。