[发明专利]一种动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中包括溶剂1乙腈、溶剂2水、溶剂3正己烷、盐1无水硫酸镁、盐2氯化钠。

2.一种基于权利要求1所述的试剂盒来检测动物源食品中红霉素及降解产物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)样品预处理：

配制浓度为1-10μg/mL的内标工作液；

在3-5g待测样品中加入50-100μL内标溶液和10-25mL溶剂1(乙腈)和溶剂2(水)的混合溶液，匀浆，得到均匀分散的食品基质；之后冰水浴超声，加入5-10mL溶剂3(正己烷)和4-8g盐1(无水硫酸镁)及盐2(氯化钠)的混合物，涡旋震荡，离心，将中间层溶液全部取出，干燥；之后复溶，离心取上清液，得到预处理之后的样品；

(2)检测：

采用Acquity UPLC CSH-C18 column(1.7μm，2.1×100mm)对预处理之后的样品中的红霉素及其降解产物进行分离、富集，通过超高液相色谱高分辨率质谱联用仪测定，得到红霉素及其降解产物峰面积和内标峰面积；将红霉素及其降解产物峰面积和内标峰面积的比值代入标准曲线，得到待测样品中红霉素及其降解产物的含量。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的匀浆前加入的溶剂1(乙腈)和溶剂2(水)的混合溶液中溶剂1和溶剂2的体积比为1:1。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述盐1(无水硫酸镁)和盐2(氯化钠)的混合物中盐1与盐2的比例为4:1-10:1(w/w)。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述红霉素及其降解产物包括红霉素(Erythromycin)、红霉素A烯醇醚(Erythromycin A enol ether)、脱水红霉素A(Dehydrated Erythromycin A)和N-去甲基红霉素A(N-Demethylerythromycin A)。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的匀浆条件是0-4℃下，以6000-10000rpm匀浆30-60s。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的复溶采用的溶剂为溶剂1(乙腈)和溶剂2(水)的混合溶液，其中溶剂1与溶剂2)的体积比为1-4:1。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述超高液相色谱的检测条件如下：

进样量：1μL；

采集模式：(ESI+)Full MS+PRM；

流动相：A相为0.1％甲酸-水(v/v)溶液；B相为乙腈溶液；

洗脱流速：0.4mL/min；

柱温：35-40℃

洗脱梯度：0-0.1min，80％流动相B；0.1-4min，85-5％流动相B；4-8min，5％流动相B；8-9min，5-80％流动相B；9-12min，80％流动相B。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述质谱的检测条件如下：

采用电喷雾电离源(ESI)；正离子模式下的Full MS+PRM模式进行检测；ESI源参数设置为：鞘气流速：40psi；

辅助气体流量：10arb；

辅助燃气加热器温度：320℃

吹扫气流量：2psi；

喷雾电压：+4.0kV；

毛细管温度：320℃。

10.权利要求2-9任一项所述的方法在食品检测领域的应用。