[发明专利]一种动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒及检测方法，属于食品检测方法技术领域。本发明所述的动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒包括溶剂1乙腈、溶剂2水、溶剂3正己烷、盐1无水硫酸镁、盐2氯化钠；之后先采用试剂盒(正己烷‑乙腈‑盐‑水萃取分离法)对动物源中红霉素及降解产物进行快速提取，再采用超高液相色谱质谱联用仪(Q Exactive HF‑X)对待测样品中目标物含量进行检测分析，通过同位素内标法和外标法(标准曲线)同时定量目标物。本发明可以实现对动物源食品中红霉素及其降解产物的快速提取和检测，能实现检出限为0.5‑1ng/mL，定量限为1‑3ng/mL。

技术领域

本发明涉及一种动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒及检测方法，属于食品检测方法技术领域。

背景技术

随着生活水平的提高，人们对鱼、肉、蛋、奶等营养必需品的需求量增加，养殖业日益兴起。由于高密度和粗放的养殖方式，使种内和种间细菌性感染疾病频发，为了解决这一问题，红霉素的使用首当其冲。养殖人员通过在饲料添加红霉素、在水产品生活的海水中添加红霉素或向畜禽类动物直接注射红霉素等方式达到抗菌的效果。但红霉素不易代谢易在活体内残留，若长期食用(摄入量＞每日0-0.7μg/kg体重)含红霉素的食物会产生过敏、腹泻、免疫力降低等症状。

国家农业部规定红霉素在动物性食品中允许检出的最大限量为200μg/kg，但红霉素对热及酸性条件敏感，易降解成其他有害产物，根据目前研究可知红霉素的主要降解产物有红霉素A烯醇醚、脱水红霉素A和N-去甲基红霉素A，这些物质依然有引起人类疾病(腹泻等)和产生耐药性的风险，所以对动物源食品中红霉素及降解产物的含量检测尤为重要，对动物源食品中红霉素及其降解产物的风险评估及食品安全有重要意义，同时为企业原料的选取和食品原料药物残留的监管提供理论支持，促进食品行业的健康发展。

但是，国标也没有明确的检测方法用于红霉素及其降解产物的检测，因此建立动物源食品中红霉素及其降解产物的检测方法是非常必要的。

发明内容

[技术问题]

目前，对于食品中红霉素及其降解产物的前处理方法主要为固相萃取法，该方法操作较复杂，耗时长，不利于大批量样品的处理；检测方法主要为色谱法或液相色谱质谱联用法，但都有灵敏度较低，精准度较差的缺点。因此，建立一种快速、高效的红霉素及其降解产物的检测方法是非常重要的。

[技术方案]

为了解决上述问题，本发明采用正己烷-乙腈-盐-水萃取分离法，对动物源中红霉素及降解产物进行快速提取，实现了高效、便捷的前处理过程，为动物源食品中红霉素及其降解产物的研究提供重要工具。

本发明的第一个目的是提供一种动物源食品中红霉素及降解产物的检测试剂盒，所述的试剂盒中包括溶剂1乙腈、溶剂2水、溶剂3正己烷、盐1无水硫酸镁、盐2氯化钠。

本发明的第二个目的是提供一种基于本发明所述的试剂盒来检测动物源食品中红霉素及降解产物的方法，包括如下步骤：

(1)样品预处理：

配制浓度为1-10μg/mL的内标工作液；

在3-5g待测样品中加入50-100μL内标溶液和10-25mL溶剂1(乙腈)和溶剂2(水)的混合溶液，匀浆，得到均匀分散的食品基质；之后冰水浴超声，加入5-10mL溶剂3(正己烷)和4-8g盐1(无水硫酸镁)及盐2(氯化钠)的混合物，涡旋震荡，离心，将中间层溶液全部取出，干燥；之后复溶，离心取上清液，得到预处理之后的样品；

(2)检测：