[发明专利]酶催化合成手性beta-氨基醇的方法

权利要求书

1.一种酶催化制备手性β-氨基醇的方法，包括如下步骤：以非对称型烯烃和胺为底物，使用单加氧酶催化氨基羟基化反应，得到手性β-氨基醇，其中

所述β-氨基醇是2-苯基-2-(N-苯基)氨基乙醇或者2-取代苯基-2-(N-苯基)氨基乙醇，所述步骤为：

以式I所示苯乙烯/取代苯乙烯和苯胺为底物，使用单加氧酶催化氨基羟基化反应，得到式II所示的(S)-构型β-氨基醇或者式III所示的(R)-构型β-氨基醇：

其中，R选自H、卤素、C1-C4烷基，

用于催化制备式II所示(S)-构型β-氨基醇的单加氧酶是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的野生型细胞色素P450-BM3 WT、氨基酸序列为SEQ ID NO:2的细胞色素突变体P450-BM3F87G、或者氨基酸序列为SEQ ID NO:3的细胞色素P450pyrTM；用于催化制备III所示(R)-构型β-氨基醇的酶是氨基酸序列分别为SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5的乙烯单加氧酶styAB，其中styA为SEQ ID NO:4，styB为SEQ ID NO:5。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述卤素选自氟F、氯Cl；所述C1-C4烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当取代基R选自卤素、C1-C4烷基时，R位于对位，反应为：

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中，所述单加氧酶呈酶形式或者其表达微生物菌体形式。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酶形式为游离酶或者固定化酶。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述微生物选自枯草芽孢杆菌、短乳杆菌、大肠杆菌、木兰假丝酵母、毕赤酵母、酿酒酵母。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当单加氧酶呈微生物菌体形式时，反应体系中还添加有葡萄糖。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系pH值为7.4-8.5。