[发明专利]HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法

权利要求书

1.HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：配制供试品溶液、对照品溶液和空白对照溶液；

步骤二：确定HPLC的色谱条件；

步骤三：用步骤一中配制的空白对照溶液、对照品溶液和供试品溶液，按照步骤二中的色谱条件进行专属性试验；

步骤四：配制不同浓度的对照品溶液，分别按照步骤二中的色谱条件测定峰面积，考察线性关系；

步骤五：取6份步骤一中配制的供试品溶液，按照步骤二中的色谱条件，进行精密度试验和重复性试验；

步骤六：用步骤一中配制的对照品溶液和供试品溶液，按照步骤二中的色谱条件，分别于配制后0h、2h、4h、8h、12h和24h进行检测，进行稳定性考察；

步骤七：进行白扁豆中葫芦巴碱的加样回收试验和耐用性试验，对不同批次白扁豆中的葫芦巴碱进行含量测定。

2.根据权利要求1所述的HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，步骤一中供试品溶液的配制方法为：将白扁豆粉碎，过三号筛得到白扁豆粉末，将白扁豆粉末和甲醇溶液加入烧瓶中，称量，超声处理30min并冷却后用甲醇溶液补足减失的质量，摇匀，过滤，取续滤液得到供试品溶液。

3.根据权利要求2所述的HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，供试品溶液中白扁豆粉末和甲醇溶液的用量比为0.6g：25mL。

4.根据权利要求1所述的HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，步骤二中HPLC的色谱条件为：色谱柱内径为4.6mm，长度为250mm，填料颗粒直径为5μm；流动相为乙腈-水；流速为1.0mg/mL；上样量为10μL；柱温为25℃；检测波长为264nm。

5.根据权利要求1所述的HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，空白对照溶液为甲醇溶液。

6.根据权利要求1所述的HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，HPLC的色谱条件中，理论塔板数按葫芦巴碱峰计算≥1000。

7.根据权利要求1所述的HPLC法测定白扁豆中葫芦巴碱的含量的方法，其特征在于，步骤四中不同对照品溶液的浓度分别为0.0005mg/mL、0.0025mg/mL、0.0051mg/mL、0.0505mg/mL、0.2524mg/mL和0.5047mg/mL。