[发明专利]检测男性不孕不育的基因文库的构建方法和试剂盒

权利要求书

1.一种检测男性不孕不育的二代测序基因文库的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：

获取样本的基因组DNA；

对所述基因组DNA中的男性不孕不育基因进行扩增，构建检测男性不孕不育基因的文库；

所述男性不孕不育基因包括非梗阻性无精子症/严重少精子症相关基因、弱/畸形精子症相关基因和少弱畸形精子症相关基因；

所述非梗阻性无精子症/严重少精子症相关基因选自如下基因中的一种或者多种：DMC1、FKBP6、MEI1、MEIOB、MAJIN、MSH4、MSH5、RAD21L1、RNF212、SHOC1、SIX6OS1、SPATA22、STAG3、SYCE1、SYCP3、TERB1、TERB2、TEX11、TEX15、TOL6BL、XRCC2、ZSWIM7、M1AP、FBXO43、RPL10L、ZMYND15、TDRD7、TDRD9、NR5A1、TEX14、USP26、ANOS1、SPINK2、USP9Y和CEP128；

所述弱/畸形精子症相关基因选自如下基因中的一种或者多种：DNAH1、DNAH2、DNAH6、DNAH17、CFAP70、CFAP43、CFAP44、CFAP251、CFAP91、SPEF2、CFAP65、FSIP2、AKAP4、CEP135、DZIP1、TTC21A、TTC29、CFAP69、QRICH2、AK7、ARMC2、CFAP47、CFAP58、DNAH8、DNAH10、CFAP206、CATIP、WDR63、DNHD1、SLO3、DRC1、STK33、SUN5、TSGA10、PMFBP1、DNAAF1、DNAAF2、DNAAF3、DNAAF4、DNAAF5、DNAAF6、ZMYND10、LRRC6、C11orf70、TTC12、DNAH5、DNAH9、DNAI1、DNAI2、CCDC39、CCDC40、GAS8、RSPH1、RSPH3、RSPH4A、RSPH9、HYDIN、DNAJB13、GAS2L2、DPY19L2、CATSPER2、ZPBP、PICK1、SPATA16、BRDT、SPAG1、SLC26A8、CATSPER1、CCNO、AURKC、C21orf59、CCDC151、CCDC114、GFPT2、PATE1、GALNTL5、IFT74、WDR1和ADCY10；

所述少弱畸形精子症相关基因选自如下基因中的一种或者多种：FANCM、CDC14A、KLHL10、SEPTIN12、SYCP2、BRWD1、CFAP61、RABL2A和KATNAL2。

2.根据权利要求1所述的检测男性不孕不育的二代测序基因文库的构建方法，其特征在于，所述样本取自特发性无精子症患者、特发性严重少精子症患者或者特发性弱/畸形精子症患者。

3.根据权利要求1或者2所述的检测男性不孕不育的二代测序基因文库的构建方法，其特征在于，扩增所述男性不孕不育相关基因对应的引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1-SEQ ID No.326所示。

4.根据权利要求1或者2所述的检测男性不孕不育的二代测序基因文库的构建方法，其特征在于，所述样本为体液或者组织。

5.一种检测男性不孕不育基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含扩增权利要求1至4任一项中定义的所述男性不孕不育基因的引物对。

6.根据权利要求5所述的检测男性不孕不育基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括DNA提取试剂。

7.根据权利要求5或者6所述的检测男性不孕不育基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于文库构建的反应试剂。

8.根据权利要求7所述的检测男性不孕不育基因的试剂盒，其特征在于，所述反应试剂包括多重PCR聚合酶、DNA连接酶、末端修复酶、dNTPs和PCR缓冲液中的一种或者多种。

9.权利要求5至8任一项所述的试剂盒在检测男性不孕不育基因中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，检测采用二代测序法。