[发明专利]一种喜树中未知类黄酮化学成分的快速鉴定方法

权利要求书

1.一种喜树中未知类黄酮化学成分的快速鉴定方法，其特征在于，包含下列步骤：

(1)将喜树组织样品顺次进行孵育、离心和过滤，得到滤液；

(2)将滤液进行液相色谱和质谱分析，筛选类黄酮类成分；

(3)将类黄酮类成分按照裂解规律进行鉴定。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述孵育所用溶剂为甲醇水溶液，所述甲醇水溶液的体积分数为70～90％；

喜树组织样品和甲醇水溶液的质量体积比为0.05～0.15g：400～600μL；

所述孵育的温度为10～70℃，时间为10～30min；

所述离心的转速为10000～14000rpm，时间为3～8min。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述过滤的滤孔直径为0.20～0.24μm；

所述过滤的转速为10000～14000rpm，温度为3～5℃，时间为8～12min。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述液相色谱分析的流动相包含甲酸水溶液和甲醇，所述甲酸水溶液的体积分数为0.05～0.15％。

5.如权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述液相色谱分析的洗脱程序为梯度洗脱；

所述梯度洗脱的程序为：0～1.5min，流动相中甲醇的体积分数为2％；大于1.5min且小于等于12min，流动相中甲醇的体积分数为2～10％；大于12min且小于等于14min，流动相中甲醇的体积分数为100％；大于14min且小于等于14.1min，流动相中甲醇的体积分数为100～2％；大于14.1min且小于等于16min，流动相中甲醇的体积分数为2％。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述液相色谱分析的流速为0.15～0.25mL/min。

7.如权利要求4或6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述质谱分析的喷雾电压为3～3.4kV，鞘流气压为30～40arb，辅流气压为8～12arb。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述质谱分析的毛细管温度为300～340℃，碰撞能量为20～60eV。

9.如权利要求1或8所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述类黄酮类成分的分子量为200～800Da。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述裂解规律包含黄酮类成分的裂解规律、黄酮醇类成分的裂解规律、黄烷酮类成分的裂解规律、查尔酮类成分的裂解规律、氧杂蒽酮类成分的裂解规律和黄烷类成分的裂解规律。