[发明专利]一种高产麦角硫因的基因工程菌在审
| 申请号： | 202210591756.2 | 申请日： | 2022-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN114854660A | 公开（公告）日： | 2022-08-05 |
| 发明（设计）人： | 张山;丁利平;焦银山 | 申请（专利权）人： | 深圳中科欣扬生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/67;C12N15/31;C12P17/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 518116 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高产 麦角 基因工程 | ||
1.一种重组菌，其特征在于，所述重组菌游离表达麦角硫因合成基因组合(a)或(b)；其中，(a)为RsEGT1和RsEGT2，(b)为RrEgtB和RrEgtC；所述RsEGT1的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示和RsEGT2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2；所述RrEgtB的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述RrEgtC的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌以大肠杆菌BW25113为出发菌株，增强基因组上HisA，HisF，cysE，NrdH，cysP，metH，mtn，lux，metK，metF的表达，抑制或降低基因组上YhaM，tnaA，TolC，metJ，mgl，YjeH，YeaS的表达。
3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，所述增强为将HisA，HisF，cysE，NrdH，cysP，metH，mtn，lux，metK，metF的启动子替换为强启动子。
4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于，所述强启动子包括J23100启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
5.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除基因组上YhaM，tnaA，TolC，metJ，mgl，YjeH，YeaS。
6.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，所述HisA，HisF，cysE，NrdH，cysP，metH，mtn，lux，metK，metF的核苷酸序列的GeneBank号依次为：946521，946516，948126，947161，946883，948522，948542，947168，945389，948432；
所述YhaM，tnaA，TolC，metJ，mgl，YjeH，YeaS的核苷酸序列的GeneBank号依次为：916164，948221，947521，94843，949036，948656，946157。
7.一种提高大肠杆菌中麦角硫因产能的方法，其特征在于，所述方法为游离表达外源麦角硫因合成基因，抑制或降低宿主菌基因组上YhaM，tnaA，TolC，metJ，mgl，YjeH，YeaS的表达，增强宿主菌基因组上HisA/HisF，cysE，NrdH，cysP，metH，mtn，lux，metK，metF的表达。
8.一种全细胞催化剂，其特征在于，所述全细胞催化剂含有权利要求1～6任一所述重组菌。
9.一种生产麦角硫因的方法，其特征在于，所述方法为将权利要求1～6任一所述重组菌或权利要求8所述全细胞催化剂接种于含有组氨酸、甲硫氨酸和半胱氨酸的培养基中进行发酵生产。
10.权利要求1～6任一所述重组菌，或权利要求7所述方法，或权利要求8所述全细胞催化剂，或权利要求9所述方法在食品、化妆品或医药领域的应用。
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