[发明专利]用于特异性识别胰岛素的基于鸟嘌呤的花菁探针及其制备方法

权利要求书

1.一种基于鸟嘌呤的花菁探针，其特征在于：所述探针的结构式为：

2.如权利要求1所述的基于鸟嘌呤的花菁探针在制备探针中的应用，其特征在于：所述基于鸟嘌呤的花菁探针在PBS缓冲溶液和表面活性剂十二烷基苯磺酸钠的混合溶液体系下用于检测胰岛素；所述混合溶液为体积比为9.25:0.75的浓度为10mM的PBS缓冲溶液与浓度为4mM的表面活性剂十二烷基苯磺酸钠的混合物，混合后十二烷基苯磺酸钠最终浓度为0.3mM，PBS缓冲溶液最终浓度为9.25mM。

3.一种如权利要求1所述的基于鸟嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：所述制备方法步骤如下：

(1)制备花菁染料CY5.5，具体步骤如下：

1)0.6g 2-萘肼盐酸盐和0.3321g 3-甲基-2-丁酮在8ml乙酸和氮气保护条件下120℃回流2.5小时，反应结束后除去溶剂，用体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯的展开剂过硅胶柱，得到中间体1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚；

2)将0.7173g 1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚和3.178g 6-溴己酸在8ml乙腈和氮气保护条件下115℃回流34小时，除去溶剂后用4ml二氯甲烷溶解随后加入4ml乙醚析出固体后过滤收集固体得到产物3-(5-羧基戊基)-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓；

3)将0.9254g 3-(5-羧基戊基)-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓和0.6980g N-[(1E，3E)-3-(苯基亚氨基)丙-1-烯-1-基]苯胺溶于10mL乙酸和10mL乙酸酐的混合溶液，在氮气下125℃回流4.5小时，反应结束后除去溶剂，得到粗品固体3-(5-羧基戊基)-1,1-二甲基-2-((1E，3E)-4-(N-苯基乙酰胺)丁烷-1,3-二烯-1-基)-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓；

4)将1.415g 3-(5-羧基戊基)-1,1-二甲基-2-((1E，3E)-4-(N-苯基乙酰胺)丁烷-1,3-二烯-1-基)-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓与0.9254g 3-(5-羧基戊基)-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓溶于10mL乙酸和10mL吡啶的混合溶液，在氮气下125℃回流2.5小时，反应结束后除去溶剂，用体积比为10:1二氯甲烷和甲醇的展开剂过硅胶柱，得到蓝色固体CY5.5染料，其结构式如下：

(2)将花菁染料CY5.5与有机碱三乙胺、缩合剂碳酰二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并三唑在N,N-二甲基甲酰胺溶液中搅拌进行活化；

(3)步骤(2)活化后加入鸟嘌呤室温反应，最后通过薄层色谱法提纯得到基于鸟嘌呤的花菁探针

4.如权利要求3所述的基于鸟嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述碳酰二亚胺盐酸盐、三乙胺、1-羟基苯并三唑和CY5.5的摩尔比为1:2:1:0.5～1:1:3.5:0.25。

5.如权利要求3所述的基于鸟嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述活化时间为0.5～1h。

6.如权利要求3所述的基于鸟嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述花菁染料CY5.5与鸟嘌呤的摩尔当量比为：1:2～1:3。

7.如权利要求3所述的基于鸟嘌呤的花菁探针的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述薄层色谱法提纯所用展开剂为体积比为30:1～25:1的二氯甲烷和甲醇的混合物。