[发明专利]一种卵细胞激活培养基及其培育方法和应用

权利要求书

1.一种卵细胞激活培养基，其特征在于，所述卵细胞激活培养基包括基础培养液和激活组分：

所述激活组分包括钙离子载体 2-6 μmol/L、IGF-2 1-100 nmol/L、人血清蛋白0.005-5 g/L、β-烟酰胺单核苷酸0.02-0.05 mg/L、辅酶Q10 0.1-2.0 mg/L。

2.根据权利要求1所述的卵细胞激活培养基，其特征在于，所述基础培养液为包括如下组分的水溶液：无机盐缓冲组分30-80g/L、氨基酸组分1-22g/L、葡萄糖0.5-1.2 g/L、乳酸钙0.1-2.0 g/L、乳酸钠1.0-5.0 g/L、丙酮酸钠0.1-0.8 g/L、四元羧酸乙二胺四乙酸0.001-000.5 g/L、丙氨酰-谷氨酰胺0.1-1.5 g/L。

3.根据权利要求2所述的卵细胞激活培养基，其特征在于，所述无机盐缓冲组分由氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、硫酸镁、碳酸氢钠、氯化钙和水按摩尔比(5-10)：(0.3-0.8)：(0.05-0.1)：(0.2-1.6)：(1.0-3.5)：(0.05-0.3)：(900-1000)组成。

4.根据权利要求2所述的卵细胞激活培养基，其特征在于，所述氨基酸组分由L-苯丙氨酸、L-羟脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、L-缬氨酸、L-天门冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸按摩尔比(0.01-0.1)：(0.01-0.1)：(0.01-0.1)：(0.01-0 .1)：(0.01-0.1)：(0.01-0.16)：(0.06-0.24)：(0.06-0.24)组成。

5.根据权利要求2所述的卵细胞激活培养基，其特征在于，还包括生物碱组分0.1-0.5g/L，所述生物碱组分由腺嘌呤、硫酸腺嘌呤、鸟嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶和腺苷三磷酸二钠按摩尔比(0.1-0.2)：(0.05-0.08)：(0.1-0.2)：(0.2-0.4)：(0.2-0.4)：(0.06-0.12)组成。

6.根据权利要求1所述的卵细胞激活培养基，其特征在于，所述激活组分还包括褪黑素0.1-5nmol/L、辅酶NADH 0.05-0.5mg/L，所述钙离子载体为A23187。

7.一种权利要求1-6任一项所述的卵细胞激活培养基的使用方法，其特征在于，具体步骤如下：

S1、先将权利要求1-6任一项所述的激活培养基加入培养器皿中；

S2、再将S1中的培养器皿置于培养箱中，以37±0.2℃、6±0.1％CO2、湿度95±1%的条件平衡4-6h；

S3、待激活培养基平衡完全后，将卵细胞放入激活培养液中，37±0.2℃、6±0.1％CO2、湿度95±1%的条件培养箱中培育10-30min，即可完成激活。

8.一种权利要求1-6任一项所述的卵细胞激活培养基的应用，其特征在于，所述的卵细胞激活培养基用于卵母细胞的激活、ICSI后的卵子或者受精卵培育，所用卵细胞选自人或哺乳动物。