[发明专利]高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法

权利要求书

1.高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法，其特征在于，该方法具体包括如下步骤：

1）系统适用性溶液的配制：分别取羟基腙、甲酯腙、对甲氧腙、氯代腙各5mg，分别置于10ml量瓶中，加混合溶剂超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备溶液；分别精密量取各储备溶液1ml，置于同一200ml量瓶中，用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；

2）供试品溶液的配制：避光操作，取待测阿哌沙班本品，精密称定，加混合溶剂溶解并稀释制成每1ml中约0.5mg的溶液，作为供试品溶液，临用新制；

3）对照溶液的配制：精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置10ml量瓶中，摇匀作为对照溶液；

4）对甲氧腙的液相色谱检测：取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，系统适应性溶液中羟基腙、甲酯腙、对甲氧腙、氯代腙依次出峰；当各杂质及主峰的相互分离度均大于1.5时，再精密量取对照溶液和供试品溶液各20µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法，其特征在于：所述混合溶剂为乙腈与水50:50的质量比溶液。

3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法，其特征在于：所述步骤4）中液相色谱仪的色谱条件为：采用Waters Xbridge Shield RP18色谱柱，规格150×4.6mm，填料粒径3.5μm；柱温40℃，梯度洗脱，流速为1.5ml/min；采用检测器为紫外检测器，检测波长295nm。

4.根据权利要求3所述的高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法，其特征在于：所述梯度洗脱采用的流动相A和流动相B均为缓冲盐-乙腈，其中流动相A和流动相B中缓冲盐和乙腈的质量比为95:5～5:95。

5.根据权利要求4所述的高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法，其特征在于：所述缓冲盐包括甲酸钠、甲酸钾、甲酸铵、醋酸钠、醋酸钾、醋酸铵、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵中的一种或多种，其浓度为20～50mmol/L。

6.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定阿哌沙班起始原料对甲氧腙的方法，其特征在于：所述步骤4）中记录色谱图后，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，按校正后的峰面积乘以杂质校正因子0.73，羟基腙不得大于对照溶液的主峰面积，甲酯腙、氯代腙不得大于对照溶液的主峰面积的0.6倍；其他杂质不得大于对照溶液主峰面积的0.2倍，杂质峰面积的和按校正后的峰面积计算不得大于对照溶液主峰面积的2倍；具体计算公式如下：

各杂质总和%=已知杂质%+其他单个杂质%

式中：A_有关物质—供试品溶液有关物质的峰面积；A_对照主峰—对照溶液主峰的峰面积。