[发明专利]一种促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基及其应用

说明书

本发明提供一种促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基及其应用，所述培养基按质量百分含量计包括如下组分组成：益生元组合物2‑5%、蛋白胨0.5‑5%、牛肉膏0.5‑2%、酵母浸膏0.1‑2%、柠檬酸氢二铵0.05‑1%、K₂HPO₄ 0.05‑1%、MgSO₄ 0.01‑1%、MnSO₄ 0.01‑1%、吐温‑80 0.05‑1%、L‑半胱氨酸盐酸盐0.05‑1%；所述益生元组合物包括质量比为(1‑2):(1‑2):(0.1‑1)的水苏糖、低聚甘露糖和低聚木糖。本发明复合益生元培养基能够明显提高乳杆菌和双歧杆菌的增殖和产酸能力，高密度培养确保肠道常见有益菌的活性和功能，使其能够有效定植肠道。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基及其应用。

背景技术

益生元是指不可被人体消化利用但可选择性促进肠道益生菌增殖和代谢的碳水化合物，其本质就是低聚糖、双歧因子，如低聚果糖、低聚半乳糖、低聚甘露糖、低聚木糖、水苏糖、抗性糊精等，为内源益生菌提供有效的碳源，刺激其生长并控制，同时间接地保护肠道健康和促进营养物质的吸收，一般不会产生过敏等免疫反应。益生元是非有机活体，以未消化形式到达肠道，不存在活率问题。

益生菌是对人和动物有益的微生物，通常被人们熟知的有乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属等，是有机活体，需要经过强酸和胆盐的考验，只有部分能活着到达肠道，补给益生菌，定植人体肠道，抑制有害菌生长，改善肠道微环境。因此如何促进其增殖、产酸及其培养，产业化成为当前研发工作者关注的重点。

CN106434492A公开了一种延长乳酸菌存活期的培养基及其制备方法。该有效延长乳酸菌存活期的培养基，以蛋白胨、酵母浸粉、甘露寡糖、脱脂奶粉、脱脂豆粕、七水硫酸镁、七水硫酸锰、玉米浆干粉、复合添加剂、磷酸二氢钠、柠檬酸钠、柠檬酸、乙酸钠、吐温80和酿酒酵母为原料制成，其虽然能在一定程度上使乳酸菌在常温下长时间保持活菌量，但其无法实现促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的目的，而且由于该配方对于乳酸菌存活友好，可能在一定程度上会抑制双歧杆菌的增值。

CN101058796A公开了一种双歧杆菌发酵的复合培养基及其制备方法，所述复合培养基由以下成分组成：螺旋藻粉50-150 g，水苏糖40-80 g，5%猪肝浸液30-100 mL，蒸馏水补足1000 mL。该发明所选婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌和长双歧杆菌3种双歧杆菌在该培养基中均生长良好，该培养基其同样存在无法实现促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的目的。

CN107653196A公开了一种保拉迪酵母菌增菌培养基及其制备方法，所述布拉迪酵母菌增菌培养基以100 mL无菌水所含的物质计，含葡萄糖4-6 g，酵母浸粉2-3 g，低聚果糖0.2-0.6 g，磷酸氢二钠0.2-0.5g，氯化钙0.1-0.5g，蛋白胨1-3g，玉米浆2-3 g，大豆低聚糖0.2-0.5 g，低聚木糖0.3-0.6 g，该培养基其同样存在无法实现促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的目的。

CN112063679A公开了一种混合益生菌发酵复合碳水化合物制备短链脂肪酸的方法，所述的发酵培养基每100 mL中包括如下含量的组分：碳源1~2 g，黏蛋白0.2~0.6 g，酪蛋白0.2~0.6 g，蛋白胨0.3~0.7 g，胰蛋白胨0.3~0.7 g等成分，其中碳源为低聚糖、非淀粉多糖、抗性淀粉和糖醇的混合物，其可实现进行体外产短链脂肪酸的目的，但培养过程中双歧杆菌属和乳杆菌属并不能进行共同培养，也无法实现促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的目的。

因此，若能开发一种能够促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基，并将其应用在生产中，实现高产高性能，使其充分定植宿主肠道，发挥其益生作用的同时显著提高肠道内二代益生菌如AKK菌的丰度，跨越其因分离鉴定、培养生产、创新药物开发繁琐流程和漫长时间等难题，实现安全、有效地发挥其功能作用，使得众多炎症性肠病、结直肠癌以及代谢等疾病的患者摆脱药物治疗带来的恐惧和副作用，无复发，具有极高的应用价值。