[发明专利]复合益生菌、其制备方法及其抗HP和抗口腔龋病中的应用

权利要求书

1.一种复合益生菌的制备方法，包括以下步骤：

分别取格氏乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌和酪酸梭菌进行活化；

将活化的酪酸梭菌菌悬液接种至发酵液体培养基中培养4～5h后；

向发酵体系中接种干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌菌悬液，继续发酵2～3h后；

继续向发酵体系中接种格氏乳杆菌菌悬液，发酵完成，收获包含所述复合益生菌的发酵液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵液体培养基包括：乳糖62.21g/L，酵母浸粉46.25g/L，酵母蛋白胨19.12g/L，磷酸二氢钠17.25g/L，磷酸氢二钠1.75g/L，MgSO₄·7H₂O 0.96g/L，MnSO₄·5H₂O 0.063g/L，L-半胱氨酸盐酸盐0.17g/L。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，酪酸梭菌发酵的条件包括：初始pH5.8～6.0、温度37℃、接种量1％，采用25％的氨水保证发酵过程中pH值5.5，同时通入氮气保持罐压0.03～0.04MPa，发酵过程中同时维持搅拌125rpm。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌菌的接种量均为3～4v/v％。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌的接种同时补入发酵体系25％体积的所述发酵液体培养基。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，格氏乳杆菌的接种量为1.5～2v/v％。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，格氏乳杆菌的接种同时补入发酵体系10％体积的所述发酵液体培养基。

8.一种复合益生菌菌剂的制备方法，包括权利要求1-6任一项所述的制备方法，以及收集所述复合益生菌的具体，混入保护剂，经过能够冷冻干燥得到所述复合益生菌菌剂。

9.一种复合益生菌菌剂，包含不低于10⁹cfu/g的格氏乳杆菌、不低于10⁸cfu/g的干酪乳杆菌、不低于10⁸cfu/g的副干酪乳杆菌和不低于10¹⁰cfu/g的酪酸梭菌，以及不低于2.00mg/g的表层蛋白。

10.权利要求1-6任一项所述的制备方法制得的复合益生菌在制备抗幽门螺杆菌制品和/或制备抗口腔龋病制品中的应用。