[发明专利]一种EPA甘油酯的制备方法

说明书

本发明提供了一种EPA甘油酯的制备方法，包括以下步骤：脂肪酶法水解鱼油，得到鱼油脂肪酸；将鱼油脂肪酸通过三个轮次冷冻结晶得到分离液；将分离液经过分子蒸馏，得到EPA及DHA；在真空条件下将EPA与甘油混合后，加入脂肪酶，搅拌，进行酯化反应得到含有EPA甘油酯的粗产物。本发明所述的EPA甘油酯的制备方法利用脂肪酶催化水解鱼油，再通过冷冻结晶分离富集EPA、DHA，然后通过分子蒸馏分离提纯得到高纯度的EPA，副产物为高纯度DHA，然后分别经过脂肪酶催化合成高纯度的EPA甘油酯、高纯度DHA甘油酯，反应条件温和，副反应少，产品安全性更高，而且副产物可以循环利用，环境污染少，生产过程安全风险低，制备工艺简单，成本低。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种EPA甘油酯的制备方法。

背景技术

摄取二十碳五烯酸，可提高身体中EPA的浓度，已经证实对治疗高脂血症、冠状动脉心脏病、高血压和炎症有效。此外，EPA还被证实能够提高一种治疗严重慢性牛皮癣药物的效果，该牛皮癣药物是低剂量的etretinate 和一种肾上腺皮质激素的混合药物。

21世纪初期，国外一系列大规模临床研究发现鱼油中有效成分Omega-3 的纯度决定着鱼油产品的疗效，即鱼油中Omega-3纯度在85％以上才有临床治疗意义。一篇刊载在国际脂肪酸及脂质研究学会官方期刊《PLEFA》的临床研究表明，93.5％纯度对比71％纯度的鱼油产品，降低甘油三酯效果提升 5.5倍。而另一篇发表在《柳叶刀》的11324例受试者平均3.5年坚持每日服用1g 90％Omega-3高纯深海鱼油的随机多中心研究中得出，每日坚持服用高纯度鱼油的人群相比对照组总死亡率下降20％，心血管疾病死亡率下降 30％，发生猝死的可能性下降45％(摘自THE LANCET·Vol 354·August 7, 1999)。

日本大洋渔业公司也已经把EPA作为一种药物开展研究。在日本，以EPA 为原料的保健食品等都已经上市，其中包括人造乳、高浓度EPA调味汁、EPA 乳化剂等，预计在不久的将来，稳定性高的EPA制剂及EPA保健品将有一个新的开发高潮。

Amarin公司开发了一种名为Vascepa的高纯度EPA药物被批准用于治疗甘油三酯水平高于500毫克/分升的患者，已在美国上市，试验结果显示，与安慰剂相比，服用该药物的患者在主要不良心血管事件中的相对风险降低了25％，给予4克Vascepa的患者心血管疾病风险降低25％，包括心脏病发作、中风、动脉阻塞的心脏手术或需要住院治疗的胸痛等，可以为接受标准治疗方案他汀类药物治疗的患者提供良好的低密度脂蛋白胆固醇控制效果，以及心血管风险降低的益处。

2004年美国初步批准了一个名为“Lovaza”的产品，“Lovaza”是一种特别的鱼油脂类调节剂，葛兰素史克药厂研发，主要是EPA和DHA的组合，表示为降低严重(≥500mg/dL)高甘油三酯血症成年患者甘油三酯(TG) 水平的膳食补充剂。

从鱼油中制炼EPA、DHA有两大发展趋势：其一是精制浓缩天然鱼油(EPA 和DHA的含量达到30％左右)；其二是采用分离提纯技术获得高纯度EPA或 DHA单体。目前高纯度EPA或DHA的产业化采用先乙酯化、再分离提纯的方法，纯度可高达90％，这类化学方法生产技术，存在一定不安全风险与环境污染问题，颇受诟病，生产企业普遍使用乙醇与鱼油先进行酯交换，然后再通过尿素包合法与分子蒸馏进行提纯，由于使用乙醇必须采用防爆车间，存在安全隐患与环境污染问题，分子蒸馏提纯过程也存在温度高、容易产生危害性副产物的风险，因此开发绿色环保的高纯度EPA、DHA生产技术非常具有积极意义。