[发明专利]一种NSC69187及其衍生物的合成方法与应用

说明书

本发明公开了一种NSC69187及其衍生物的合成方法与应用，具体的说，发明所制备的NSC69187衍生物CX24能够特异性抑制TLR3，且具有良好的体内外抗炎活性；在体内动脉粥样硬化模型中，可以抑制斑块形成、提高斑块稳定性以及减少病变部位炎症浸润，表现出良好的抗动脉粥样硬化作用，为临床动脉粥样硬化治疗提供新的分子选择和理论依据。

技术领域

本发明涉及化合物有机合成的技术领域，具体涉及一种 NSC69187及其衍生物的合成方法与应用。

背景技术

长链dsRNA是TLR3的天然配体，包括外源性dsRNA病毒，如脊髓灰质炎病毒、脑心肌炎病毒、柯萨奇病毒等；DNA病毒，如疱疹病毒等；感染复制过程中释放的dsRNA；人工合成dsRNA类似物，如Poly I:C，Poly A:U等；以及由损伤和坏死细胞等释放的内源性dsRNA。其能够选择性地与细胞内体的TLR3形成dsRNA-TLR3 复合物，导致TLR3二聚化，启动下游信号级联反应。TLR3是TLR 家族中，唯一不依赖MyD88衔接蛋白，而是招募TRIF衔接蛋白触发下游信号级联反应的TLR。TLR3识别dsRNA后，招募TRIF衔接蛋白，活化IFN通路，可以通过下游TRIF/TRAF3/TBK1/IRF3信号级联传递信号，使干扰素转录因子3(IRF3)进入细胞核，促进IFN α和IFNβ等I型干扰素分泌；也可以通过下游TRIF/TRAF6/TAK1信号级联传递信号，活化MAPK和NF-κB通路，使AP-1和核转录因子NF-κB进入细胞核，促进IL-6、TNF-α和IL-1β等炎症因子、MCP-1 和CCL5等趋化因子，以及内皮粘附因子的释放，激活先天性免疫反应，和调节获得性免疫反应。TLR3信号通路的激活在机体应对病原体感染和肿瘤免疫等方面起重要作用，通过人工合成dsRNA类似物激活TLR3，以模拟体内TLR3介导的免疫反应，在肿瘤治疗、疫苗佐剂研发和抗病毒感染研究中取得很好的成果。然而，相关研究也显示TLR3的异常活化和表达参与到肿瘤恶化、炎症和中枢神经系统等相关疾病的调节中。

TLR3的异常表达对于动脉粥样硬化疾病发生、发展过程有重要影响，抑制TLR3是潜在的动脉粥样硬化治疗方法，而目前尚未有药理学研究报道TLR3抑制剂的动脉粥样硬化治疗作用。

发明内容

针对现有技术中存在的上述技术问题，本发明提出了一种 NSC69187及其衍生物的合成方法与应用，本发明所制备的 NSC69187衍生物CX24能够特异性抑制TLR3，且具有良好的体内外抗炎活性；在体内动脉粥样硬化模型中，可以抑制斑块形成、提高斑块稳定性以及减少病变部位炎症浸润，表现出良好的抗动脉粥样硬化作用，为临床动脉粥样硬化治疗提供新的分子选择和理论依据。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种NSC69187的合成方法，所述合成方法包括：

A 5-甲基吲哚、2,5-己二酮和对甲苯磺酸一水合物溶解于无水乙醇中，80℃回流3h；乙醇旋干，反应物加硅胶粉拌匀、干燥后，转移至索氏提取器中，正己烷69℃回流、提取；收集提取瓶中的液体，旋干得到白色粉末状固体化合物CX1-a；

B N-甲基甲酰苯胺、三氯氧磷和甲苯混合于洁净干燥的反应瓶中，室温反应半小时；将化合物CX1-a溶解于甲苯中，并逐滴加入反应瓶混合物中，升温至105℃，反应4h；甲苯旋干，超声条件下，加入乙醇溶解不溶固体；硅胶柱纯化，得到淡黄色固体粉末化合物 CX1-b；

C将化合物CX1-b与氨基乙醛二乙缩醛混合于洁净干燥的反应瓶中，升温至115℃，反应3h；反应液冷却至室温，加入无水乙醇和硼氢化钠，室温搅拌1h；旋干乙醇，使用饱和氯化钠溶液和乙酸乙酯萃取，收集有机相，旋干乙酸乙酯；硅胶柱纯化(洗脱液为乙酸乙酯/石油醚/三乙胺，得到淡黄色油状液体化合物CX1-c；