[发明专利]一种利用重离子辐照获得高产蓝色素节杆菌的筛选方法

权利要求书

1.一种利用重离子辐照获得高产蓝色素节杆菌的筛选方法，包括以下步骤：

⑴将QL17菌株按5%的接种量接种到R2A液体培养基中，在pH=7.0、15℃、160rpm的条件下摇床培养72h，得到QL17菌株发酵液；

⑵将QL17菌株发酵液用质量浓度为0.9%的无菌盐水进行连续稀释，得到稀释度为10^-6的细菌稀释液；

⑶将100μl细菌稀释液移入无菌小皿中，采用中国科学院近代物理研究所HIRFL产生的12C⁶⁺重离子束辐照该细菌稀释液，辐照剂量为500Gy；

⑷选取500Gy辐照条件下菌液涂布于R2A琼脂平板上，挑取单个菌落接种于96孔板和R2A琼脂平板中，15℃培养；每12小时在分光光度计上于590nm处检测吸光度，得到蓝色素产量增高最大的突变体，即为天然蓝色素节杆菌，记作M157。

2.如权利要求1所述的一种利用重离子辐照获得高产蓝色素节杆菌的筛选方法，其特征在于：所述步骤⑴中QL17菌株来源于珠穆朗玛峰北坡东绒布冰川土壤，其分类命名为抗氧化节杆菌（Arthrobacter sp. QL17），在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCC1.2948。

3.如权利要求1所述的一种利用重离子辐照获得高产蓝色素节杆菌的筛选方法，其特征在于：所述步骤⑴中R2A液体培养基是指将酵母浸出粉0.5g、蛋白胨0.5g、酪蛋白水解物0.5g、葡萄糖0.5g、可溶性淀粉0.5g、磷酸氢二钾0.3g、无水硫酸镁0.024g、丙酮酸钠0.3g与1L纯水混合均匀后，即得。

4.如权利要求1所述的一种利用重离子辐照获得高产蓝色素节杆菌的筛选方法，其特征在于：所述步骤⑶中辐照参数如下：通过50μm不锈钢窗、20μm Mylar薄膜和1.3m空气后，80 MeV/u 12C⁶⁺ 离子变为76.37 MeV/u；在水中的范围预计为16毫米，峰值位置为15.5毫米。