[发明专利]抗PD-1人源化抗体或其抗原结合片段及其应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及抗PD‑1人源化抗体或其抗原结合片段及其应用。该抗体能高效、特异性结合PD‑1，并能有效阻断PD‑1与PD‑L1、PD‑L2结合；因此，该抗体或其抗原结合片段、及其相关的核酸、载体、细胞或药物组合物能够制备用于治疗PD‑1介导的疾病或病症的药物。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域。更具体地，涉及抗PD-1人源化抗体或其抗原结合片段及其应用。

背景技术

程序死亡因子-1(PD1)是CD28家族成员，在活化的B细胞，T细胞及髓样细胞上表达。人PD1由基因Pdcd1编码，位于2q37.3，全长9.6kb，由5个外显子和4个内含子组成，其上游包含663bp的启动子。PD1为55KDa的I型跨膜蛋白，分子结构由胞外区，跨膜区及胞内区组成，胞外区含有一个免疫球蛋白可变区IgV结构域，胞内区含有免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和免疫受体酪氨酸转换作用模块(ITSM)。PD-1胞外区氨基酸序列和CTLA-4有24％的同源性，与CD28有28％的同源性。在T细胞被激活后，PD-1主要通过ITIM将酪氨酸磷脂酶SHP2集合，导致下游效应分子去磷酸化。

PD-1有两个配体：PD-L1和PD-L2。PD-L1和PD-L2都是B7同源物，PDL基因位于人染色体9P24.2位点，大小为42kb，其分子结构均包含一个免疫球蛋白样可变区结构域，一个恒定区样结构域，一个跨膜区和一个短的胞质尾巴。

PD-1与PD-L1和PD-L2结合后可下调T细胞的活化。PD-L1表达于多种肿瘤细胞表面，这些肿瘤细胞包括：肺癌，胃癌，肝癌，食道癌，肾癌，卵巢癌，宫颈癌，乳腺癌，皮肤癌，结肠癌，膀胱癌，神经胶质癌，头颈癌，口腔鳞状细胞癌。而且这些癌症周边发现大量表达PD-L1的CD8+T细胞，临床结果统计显示，PD-L1在肿瘤细胞上的高表达水平与癌症患者不良预后有关。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有抗体结合PD-1的亲和力和特异性不高的缺陷和不足，提供抗PD-1人源化抗体或其抗原结合片段及其应用。

本发明的目的是提供抗PD-1人源化抗体或其抗原结合片段，所述抗体包含轻链CDR区和重链CDR区，重链CDR区由HCDR1、HCDR2、HCDR3组成，轻链CDR区由LCDR1、LCDR2、LCDR3组成，HCDR1、HCDR2、HCDR3的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:8～10所示，LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:11～13所示；所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3～5任一项所示。

所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6～7任一项所示。

本发明还涉及所述抗体或其抗原结合片段相关的核酸、载体、细胞或药物组合物。

本发明还涉及所述抗体或其抗原结合片段、及其相关的核酸、载体、细胞或药物组合物在制备用于治疗PD-1介导的疾病或病症的药物中的用途。

附图说明

图1是不同浓度的PD-1-112-C2对IL-2/IFN-γ分泌的影响结果图。

图2是不同浓度的PD-1-112-C2对T细胞增殖和T细胞分泌细胞因子IL-2的影响结果图。

图3是不同浓度的PD-1-112-C2对T细胞增殖和T细胞分泌细胞因子IFN-γ的影响结果图。

图4是抗PD-1人源化抗体c53对肿瘤体积的影响结果图。

图5是抗PD-1人源化抗体c53对小鼠生存期的影响结果图。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。