[发明专利]一种体外制备血小板的方法及其培养基

权利要求书

1.一种体外制备血小板的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)分离纯化血液样本中的干细胞；2)于巨核细胞分化培养基中培养；3)更换为血小板成熟培养基；4)收集成熟的血小板。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述血液样本为人脐带血。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分离纯化步骤为透过磁力分离血液样本中的干细胞。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干细胞为CD34⁺人造血干细胞。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述巨核细胞分化培养基包含人血小板生成素和干细胞因子。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述巨核细胞分化培养基包含SFEM培养基、50-100μg/mL人血小板生成素、50μg/mL干细胞因子。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述巨核细胞分化培养基包含SFEM培养基、100μg/mL人血小板生成素、50μg/mL干细胞因子。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述巨核细胞分化培养基包含ROCK抑制剂。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述ROCK抑制剂为Y-27632。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述血小板成熟培养基包含胰岛素-转铁蛋白-硒、谷氨酰胺、硫代甘油、抗坏血酸、FBS、青链霉素、肝素、人血小板生成素、ROCK抑制剂、ADAM17抑制剂、AhR拮抗剂。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述血小板成熟培养基包含IMDM培养基、1×胰岛素-转铁蛋白-硒、1×谷氨酰胺、0.45mM硫代甘油、50g/mL抗坏血酸、15％FBS、1×青链霉素、10U/mL肝素、50μg/mL人血小板生成素、10μM Y-27632、15μM KP-457、0.75μMSR-1。