[发明专利]用于检测香杏丽蘑和双孢蘑菇的引物探针组合及检测方法

权利要求书

1.用于检测香杏丽蘑和双孢蘑菇的引物探针组合，其特征在于，包括正反向引物、香杏丽蘑探针、双孢蘑菇探针和质控探针；所述正反向引物的序列如SEQ ID No.1和SEQ IDNo.2所示；所述香杏丽蘑探针、双孢蘑菇探针和质控探针的序列依次如SEQ ID No.3-SEQID No.5所示；

以所述引物探针组合，进行Real-time PCR扩增，所述Real-time PCR扩增的参数为：预变性温度94℃，30s，变性温度94℃，5s，退火延伸温度60℃，31s，40个循环；

所述Real-time PCR扩增的反应体系为：Probe qPCR预混液10μL、待测蘑菇样品DNA模板2μL，灭菌的去离子水4.5μL；正反向引物各1μL，浓度均为10μmol/L；香杏丽蘑探针、双孢蘑菇探针和质控探针各0.5μL，浓度均为10μmol/L；体系总体积20μL；

根据PCR扩增曲线对待测蘑菇样品中香杏丽蘑和双孢蘑菇的DNA含量进行定性定量检测。

2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述香杏丽蘑探针、双孢蘑菇探针和质控探针的5'端修饰有报告基团，3'端修饰有淬灭基团。

3.根据权利要求2所述的引物探针组合，其特征在于，所述报告基团为FAM、HEX、ROX或CY5中的一种；所述淬灭基团为TAMRA、MGB、BHQ1或BHQ2中的一种。