[发明专利]一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法

权利要求书

1.一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法,其特征在于：包括以下步骤：

S1.对虾糜样品进行粗脂提取，制得虾糜粗脂，粗脂提取过程包括将虾糜样品放入粗脂提取瓶，并通过离心机实现粗脂提取，粗脂提取瓶包括带瓶盖(1)的瓶体(2)，瓶体(2)中部设有反应腔(3)，反应腔(3)一侧自上而下依次设有带提取剂的提取腔(4)、带分离剂的分离腔(5)，反应腔另一侧自上而下依次设有带第一萃取剂的第一萃取腔(6)、带第二萃取剂的第二萃取腔(7)、带第三萃取剂的第三萃取腔(8)，提取腔(4)、分离腔(5)、第一萃取腔(6)、第二萃取腔(7)和第三萃取腔(8)内设有与垂直于反应腔(3)的推杆(9)，推杆(9)一侧设有用于实现与反应腔(3)隔绝的密封圈(10)，推杆(9)另一侧设有按钮(12)，反应腔(3)下侧设有排液口(15)，排液口(15)下侧设有排液机构；

所述的瓶体(2)两侧设有与按钮(12)相对应的安装孔(13)，安装孔(13)内设有复位弹簧(14)，复位弹簧(14)一端连接安装孔(13)，复位弹簧(14)另一端连接按钮(12)；

所述的排液机构包括排液块(16)，排液块(16)上设有与排液口(15)相对应的流道(17)，排液块(16)两侧设有拨杆(18)，瓶体(2)内设有与拨杆(18)相对应的导向槽(19)；

S2.从虾糜粗脂中进行虾糜磷脂的分离纯化，制得虾糜磷脂；

S3.对虾糜磷脂通过液相色谱-质谱联用法进行液相色谱-质谱分析，并结合化学计量学的方法对虾糜磷脂进行鉴别和定量分析，实现对虾糜样品的品种鉴别。

2.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法，其特征在于，所述的提取剂为以质量比计48份的氯仿-甲醇混合液，分离剂为以质量比计24份的超纯水，第一萃取剂、第二萃取剂和第三萃取剂为以质量比计35份的氯仿。

3.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法，其特征在于，所述的虾糜样品加入量为以质量比计6份的虾糜样品，加入后盖上瓶盖(1)，向推动提取腔(4)中的推杆(9)，使提取剂进入反应腔(3)，推杆(9)会在复位弹簧(14)的作用下实现复位，接着通过超声辅助对虾糜样品进行提取，提取时间为30分钟，然后通过推杆(9)将分离剂添加到反应腔(3)，并用8000r/min高速冷冻离心15min，接着通过转动拨杆(18)将排液块(16)上的流道(17)与排液口(15)对齐，使下层有机相能转移出来，接着通过推杆(9)将第一萃取剂加入到反应腔(3)中，实现对反应腔中余下上清液和固形物的萃取，将下层有机相通过排液块(16)排出，接着通过推杆(9)将第二萃取剂加入到反应腔(3)，再次萃取，将下层有机相再次通过排液块(16)排出，最后通过推杆(9)将第三萃取剂加入到反应腔(3)，完成最终萃取，将下层有机相通过排液块(16)排出，将合并后的下层有机相转移至提取容器中，使用旋转蒸发仪在55℃下使氯仿蒸发，提取容器中的残留物即为虾糜粗脂。

4.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法，其特征在于，所述的S2中虾糜磷脂制备的具体过程为：虾糜粗脂中加入丙酮，充分振荡，萃取，然后以8000r/min冷冻离心10min，取出上清液，将离心管中剩余的沉淀用氮吹仪吹干，分离纯化得到虾糜磷脂。

5.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法，其特征在于，所述的S3中对虾糜磷脂通过液相色谱-质谱联用法进行液相色谱-质谱分析中，液相色谱分析中采用乙腈-水溶液体系作为流动相，并在流动相中加入了甲酸，且流动相的流速为600μL·min^-1，色谱柱的柱温为30℃。

6.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法，其特征在于，所述的S3中对虾糜磷脂通过液相色谱-质谱联用法进行色谱-质谱分析中，质谱分析中采用负离子模式进行检测，检测的范围设置为600-1000Da，喷雾电压(IS)设置为-4500V，去簇电压(DP)为-70V，射入电压(EP)为20V，碰撞电压(CE)为-20V。

7.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学鉴定虾糜制品品种的方法，其特征在于，所述的S3中化学计量学分析的具体过程如下：基于化学计量学对液相色谱-质谱联用法得到的虾糜磷脂数据进行统计分析，对虾糜磷脂进行鉴别和定量分析，构建了PCA，OPLS-DA和聚类热图模型。