[发明专利]一种类器官培养用组织保存液及其制备方法有效
申请号: | 202210671714.X | 申请日: | 2022-06-14 |
公开(公告)号: | CN114946837B | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 林春连;程蓉 | 申请(专利权)人: | 福建瑞庚生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京圣州专利代理事务所(普通合伙) 11818 | 代理人: | 李春 |
地址: | 350100 福建省福州市闽侯县上街镇新洲村、马排村,南屿镇葛岐村(医工(福建)科技发展有限公*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种类 器官 培养 组织 保存 及其 制备 方法 | ||
1.一种类器官培养用组织保存液,其特征在于:保存液的成分为DMEM/F12培养基、青霉素-链霉素、Y27632、HEPES和基于功能核酸的HGF模拟物;
青霉素-链霉素的质量浓度为0.9-1.2%,Y27632的摩尔浓度为8-12μM,HEPES的摩尔浓度为9-13mM,HGF模拟物的摩尔浓度为0.9-1.3μM;
基于功能核酸的HGF模拟物包括功能核酸Ap-1、Ap-2,Ap-1为如SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列,Ap-2为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的一种类器官培养用组织保存液,其特征在于:青霉素-链霉素的质量浓度为1%,Y27632的摩尔浓度为10μM,HEPES的摩尔浓度为10mM,HGF模拟物的摩尔浓度为1μM。
3.一种如权利要求1或2所述的类器官培养用组织保存液的制备方法,其特征在于,步骤如下:
S1、按照浓度要求分别配制DMEM/F12培养基、Y-27632、HEPES、青霉素-链霉素、HGF模拟物溶液;
S2、于20mLDMEM/F12培养基中依次加入10μMY-27632、10mMHEPES、1%青霉素-链霉素,配置成保存液A;
S3、于保存液A中加入1μMHGF模拟物,即得。
4.根据权利要求3所述的一种类器官培养用组织保存液的制备方法,其特征在于,基于功能核酸的HGF模拟物制备方法如下:将功能核酸Ap-1和Ap-2的干粉分别溶于纯水配成100μM,各自取母液12μL并添加18μL缓冲液充分混匀后,配成40μMAp-1和Ap-2溶液;将配成的溶液置于金属浴95℃加热5min,迅速放置冰上半小时,然后Ap-1和Ap-2以1:1混合,室温震荡15min,得60μL20μM基于功能核酸的HGF模拟物。
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