[发明专利]恒温环型核酸扩增法引物组及以其扩增核酸的方法

权利要求书

1.一种恒温环型核酸扩增法(LAMP)引物组，包括FIP、BIP、F3、与B3之原始LAMP引物，以及至少一自主引物：

其中这些原始LAMP引物靶向核酸上的区域F3、F2、F1C、B1C、B2、及B3，且区域F3、F2、F1、B1C、B2C、及B3C在该核酸之一顺向链的5’端往3’端依序排列；

其中该引物FIP包括靶向该区域F1C及该区域F2的寡核苷酸，且该引物BIP包括靶向该区域B1C及该区域B2的寡核苷酸；以及

其中该至少一自主引物靶向的一区域位在从F3到B3的区域之外。

2.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该核酸为DNA、RNA、或其组合。

3.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该至少一自主引物靶向的该区域位在该区域F3的上游或该区域B3的上游。

4.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该至少一自主引物包括至少一对自主引物，分别靶向区域F4及区域B4，该区域F4位在该区域F3的上游，且该区域B4位在该区域B3的上游。

5.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该至少一自主引物包括两对自主引物，分别靶向区域F4、B4、F5、及B5，该区域F5位在该区域F4的上游，该区域F4位在该区域F3的上游，该区域B5位在该区域B4的上游，且该区域B4位在该区域B3的上游。

6.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该至少一自主引物包括三对自主引物，分别靶向区域F4、B4、F5、B5、F6、及B6，该区域F6依序位在该区域F5、该区域F4、及该区域F3的上游，且该区域B6依序位在该区域B5、该区域B4、及该区域B3的上游。

7.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该至少一自主引物的一工作浓度范围为0.1μM至2μM。

8.如权利要求1所述的LAMP引物组，其中该从F3到B3的区域至少有200个核苷酸长。

9.一种扩增核酸的方法，包括步骤：

提供包括FIP、BIP、F3、与B3之原始LAMP引物，其中这些原始LAMP引物靶向核酸上的区域F3、F2、F1C、B1C、B2、及B3，且区域F3、F2、F1、B1C、B2C、及B3C在该核酸之一顺向链的5’端往3’端依序排列，其中该引物FIP包括靶向该区域F1C及该区域F2的寡核苷酸，且该引物BIP包括靶向该区域B1C及该区域B2的寡核苷酸；

提供至少一自主引物，其中该至少一自主引物靶向的一区域位在从F3到B3的区域之外；以及

利用这些原始LAMP引物及该至少一自主引物扩增一样本中的该核酸。

10.如权利要求9所述的扩增核酸的方法，其中该核酸系通过具有链置换活性的一聚合酶来进行扩增。

11.如权利要求9所述的扩增核酸的方法，其中该核酸为DNA、RNA、或其组合。

12.如权利要求9所述的扩增核酸的方法，其中该至少一自主引物靶向的该区域位在该区域F3的上游或该区域B3的上游。

13.如权利要求9所述的扩增核酸的方法，其中该至少一自主引物包括至少一对自主引物，分别靶向区域F4及区域B4，该区域F4位在该区域F3的上游，且该区域B4位在该区域B3的上游。

14.如权利要求9所述的扩增核酸的方法，其中该至少一自主引物包括两对自主引物，分别靶向区域F4、B4、F5、及B5，该区域F5位在该区域F4的上游，该区域F4位在该区域F3的上游，该区域B5位在该区域B4的上游，且该区域B4位在该区域B3的上游。