[发明专利]一种以小花为外植体建立姜荷花再生体系的方法

权利要求书

1.一种以小花为外植体建立姜荷花再生体系的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）在姜荷花小花即将开放或开放1朵时将花枝采下，取上部花序部分，用75%酒精消毒5min后，加2%次氯酸钠和0.1‰-0.2‰的吐温消毒7-8min，无菌水冲洗1次后，加2%次氯酸钠消毒7-8min，无菌水冲洗3-4次后置于灭菌纸上备用；

2) 将清理干净的姜荷花在无菌纸上切去苞片，将每片苞片内小花成簇切下，以小花为外植体，接种到不定芽诱导培养基中，置于25℃±1℃，光照14±0.5 h/d，光强3000-5000LX条件下培养30-40天，直至产生不定芽；

所述不定芽诱导培养基的制备方法为：在MS培养基中添加30 g/L蔗糖和6.5g/L卡拉胶，得到基础培养基，然后添加0.5mg/L的TDZ，最后将培养基的酸碱度调节至5.8;

3）将步骤2)诱导的不定芽转至增殖培养基中，置于25℃±1℃，光照14±0.5 h/d，光强3000-5000LX条件下进行培养；

所述增殖培养基的制备方法为：在MS培养基中添加30 g/L 蔗糖和6.5g/L卡拉胶，得到基础培养基，然后添加0.2 mg/L TDZ 和NAA 0.2 mg/L，最后将培养基的酸碱度调节至5.8;

4) 培养至增殖后，将姜荷花苗在水中培养炼苗3-5d，炼苗后直接进行移栽，然后按常规苗进行水肥管理。