[发明专利]一株高产溶葡萄球菌酶的大肠杆菌突变体有效

专利信息
申请号: 202210680493.2 申请日: 2022-06-15
公开(公告)号: CN115125235B 公开(公告)日: 2023-06-27
发明(设计)人: 徐振上;王婷;刘新利;王家朋;严梦远;朱珂莹 申请(专利权)人: 齐鲁工业大学
主分类号: C12N13/00 分类号: C12N13/00;C12N1/20;C12N9/52;C12Q1/10;C12R1/19
代理公司: 济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270 代理人: 朱洪菊
地址: 250300 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 高产 葡萄球菌 大肠杆菌 突变体
【权利要求书】:

1. 一种大肠埃希氏菌(Escherichia coil)BL21/(DE3)/pOpt-lys 4-36,保藏日期为2022.5.23,保藏机构为中国普通微生物菌种保藏管理中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号CGMCC No.24960。

2. 权利要求1所述大肠埃希氏菌(Escherichia coil)BL21/(DE3)/pOpt-lys 4-36生产溶葡萄球菌酶的方法,其特征在于,包括如下步骤:

① 将大肠埃希氏菌(Escherichia coil)BL21/(DE3)/pOpt-lys 4-36培养于含有氨苄青霉素的LB培养基,35-37℃摇床180-200rpm培养11-13 h获得种子液;

② 将种子液以体积分数2 -3%的比例转接至含有氨苄青霉素的LB培养基中,培养到OD600至0.6-0.7;

③ 添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,终浓度为0.45-0.55 mM,并在180-200rpm、35-37℃下诱导培养35-37 h,获得溶葡萄球菌酶发酵液。

3.如权利要求2所述方法,其特征在于,步骤①、步骤②中氨苄青霉素的终浓度为100μg/mL。

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