[发明专利]一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外评测方法

权利要求书

1.一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、取含苦参碱的面霜、地塞米松软膏或酮康唑软膏，使用灭菌后的纯化水按照不同稀释倍数分别稀释2份备用；另取同等体积的2份纯化水，备用；

S2、分别取含苦参碱的面霜稀释液、纯化水、地塞米松或酮康唑的稀释液两份，一份加入透明质酸酶溶液，另一份加入同等体积的醋酸缓冲液，保温放置；

S3、在S2中加入透明质酸酶溶液的混合液中加入透明质酸钠溶液、在另一份加入同等体积醋酸缓冲液，保温一段时间后取出冷却至室温；

S4、根据ELISA透明质酸酶试剂盒使用方法，往试剂盒中添加S3中的待测物质，测定吸光度(OD值)，通过OD值计算透明质酸酶的抑制率；

S5、以面霜稀释液透明质酸酶抑制率与地塞米松或酮康唑稀释液的透明质酸酶抑制率进行对比，若面霜稀释液透明质酸酶抑制率达到地塞米松或酮康唑稀释液的透明质酸酶抑制率的50％以上(含50％)，即判定该面霜具有舒缓功效，若低于50％，则没有舒缓功效。

2.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述S1中稀释倍数为2～8倍。

3.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述S2中透明质酸酶溶液用醋酸缓冲液作为溶液配制，现配现用，且保温时间为10～30分钟，温度为20℃～40℃。

4.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述S3中保温时间为10～30分钟，温度为20℃～40℃。

5.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述S4中以待测物质的浓度为纵坐标，OD450值为横坐标，制作标准曲线，根据待测物质的OD450值，计算透明质酸酶的抑制率。

6.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述S5计算公式为(面霜稀释液透明质酸酶的抑制率/地塞米松或酮康唑稀释液透明质酸酶的抑制率)*100％。

7.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述面霜稀释液透明质酸酶的抑制率计算方式为：[(加入透明质酸酶的面霜稀释液的OD值-未加透明质酸酶的面霜稀释液OD值)-(加入透明质酸酶的纯化水的OD值-未加透明质酸酶的纯化水的OD值)]/(加入透明质酸酶的面霜稀释液的OD值-未加透明质酸酶的面霜稀释液OD值)。

8.根据权利要求1一种用于含苦参碱面霜舒缓功效的体外测评方法，其特征在于，所述地塞米松或酮康唑稀释液透明质酸酶抑制率的计算方式为：[(加入透明质酸酶的地塞米松或酮康唑稀释液的OD值-未加透明质酸酶的地塞米松或酮康唑稀释液的OD值)-(加入透明质酸酶的纯化水的OD值-未加透明质酸酶的纯化水的OD值)]/(加入透明质酸酶的地塞米松或酮康唑稀释液的OD值-未加透明质酸酶的地塞米松或酮康唑稀释液的OD值)。