[发明专利]一种从微拟球藻中提取杀灭纤毛虫物质的方法

权利要求书

1.一种从微拟球藻中提取杀灭纤毛虫物质的方法，其特征在于，以微拟球藻(Nannochloropsisoceanica)LAMB204为原料，破碎后使用制备液相进行分离；所述微拟球藻LAMB204保藏号为CGMCC NO.20713，保藏日期为2020年10月23日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编:100101。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微拟球藻LAMB204的破碎方法为：将微拟球藻LAMB204培养到平台期，将平台期的藻液在8000r/min下离心10min；将离心后的上清液过滤。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述微拟球藻LAMB204的培养基为F/2海水培养基。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述F/2海水培养基包括以下物质：每1L海水包括：NaNO₃ 75mg、NaH₂PO₄·H₂O 5mg、Na₂SiO₃·9H₂O 20mg、Na₂EDTA 4.36mg、FeCl₃·6H₂O3.16mg、CuSO₄·5H₂O 0.01mg、ZnSO₄·7H₂O 0.023mg、CoCl₂·6H₂O 0.012mg、MnCl₂·4H₂O0.18mg、Na₂MoO₄·2H₂O 0.07mg、维生素B₁ 0.1mg、维生素B₁₂0.5μg、生物素0.5μg。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，微拟球藻LAMB204的培养方法为：培养温度23±1℃，光照强度70μmolphotons/s/m²，照射昼夜比为12:12，盐度30‰，pH＝7.8。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，制备液相色谱方法如下：

仪器：Waters2545系列，配2789紫外可见检测器和2767馏分收集器；

色谱柱：Waters XTerra prep RP C18 7.8x150mm,10um；

紫外波长：200nm；

进样量：100uL；

流动相：A-甲醇；B-0.5％乙酸水溶液；

洗脱梯度：

7.一种如权利要求1所述的方法提取的杀灭纤毛虫的物质。

8.一种检测如权利要求7所述的物质的方法，其特征在于，高效液相色谱方法如下：

仪器：Waters1525液相色谱系统，配2998PDA检测器和2707自动进样器；

色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18 4.6x250mm,5um；柱温30℃；

紫外波长：190nm-400nm全波长扫描；

进样量：10μL；

流动相：A-甲醇；B-0.1％三氟乙酸水溶液；

洗脱梯度：

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述纤毛虫为鞭毛虫和海洋尾丝虫。