[发明专利]一种制备沙门菌外膜囊泡的方法及其应用

权利要求书

1.一种制备沙门菌外膜囊泡的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)以鼠伤寒沙门菌UK-1菌株为模板，敲除ΔfliC、ΔfljB、ΔompA、ΔompC和ΔompD基因，得到突变菌株QS001；

2)将截断脂多糖O抗原链的突变敲除以及脂多糖突变敲除waaJ和rfbP引入突变株QS001，得到突变菌株QS002；

3)在O抗原突变株中引入加入突变，该突变将野生型lipid A结构变成单磷酸lipid A结构，得到突变菌株QS003；

4)通过液体培养基培养突变菌株QS003得到沙门菌外膜囊泡。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

所述编码fliC蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码fljB蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码ompA蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，编码ompC蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，编码ompD蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

所述敲除的突变基因rfbP的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，编码所述O抗原的基因簇序列如SEQ ID NO.7所示。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

将权利要求1制备得到的沙门菌QS003接种于LB液体培养基中震荡培养过夜。

5.权利要求1-4任一项所述方法制备的沙门菌外膜囊泡在制备免疫和疫苗免疫增强剂中的应用。