[发明专利]一种脂联素试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种脂联素试剂盒，其特征在于：包括R1试剂、R2试剂，溶剂为纯化水；其中，

所述的R1试剂包括：缓冲液A 25～100mM、稳定剂A 3～11g/L、防腐剂A 2～4g/L、反应增强剂2～7g/L、表面活性剂2～5g/L；

所述的R2试剂包括：缓冲液B 25～100mM、稳定剂B 3～11g/L、防腐剂B 2～4g/L、偶联有脂联素抗体的胶乳微球1～2mg/L。

2.根据权利要求1所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述的缓冲液A和缓冲液B为甘氨酸缓冲液、MES缓冲液、MOPS缓冲液中的两种或三种结合。

3.根据权利要求2所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述的缓冲液A和缓冲液B成分为：甘氨酸缓冲液10～50mM，MES缓冲液5～25mM，MOPS缓冲液10～25mM。

4.根据权利要求1所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述的稳定剂A和稳定剂B成分为：牛血清白蛋白1～3g/L、酪蛋白1～3g/L、甘露醇1～5g/L。

5.根据权利要求1所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述的防腐剂A和防腐剂B成分为：叠氮钠1～2g/L、Proclin300 1～2g/L。

6.根据权利要求1所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述R1试剂中的反应增强剂成分为：聚乙二醇6000 1～4g/L、聚乙二醇8000 1～3g/L。

7.根据权利要求1所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述R1试剂中的表面活性剂成分为：Tween20 1～2.5g/L、Triton-X100 1～2.5g/L。

8.根据权利要求1所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述的脂联素抗体为人脂联素单克隆抗体，抗体的加入量为0.1～0.5mg/L。

9.根据权利要求1-8任一项所述的脂联素试剂盒，其特征在于：其制备方法为：

1)R1试剂的制备：按照脂联素R1试剂的组分含量，将各组分物质于同一容器中混合，混合均匀后，制得脂联素R1试剂；

2)R2试剂的制备：

①活化：取缓冲液B总量的40-60％，加入胶乳微球，在37℃摇床搅拌10-15min混匀，再加入偶联剂，继续搅拌30-35min混匀，分别得到活化胶乳微球；

②标记：向活化胶乳微球中边搅拌边加入脂联素抗体，在37℃摇床搅拌60-120min混匀，得到偶联有脂联素抗体的胶乳微球；

③封闭：向偶联有脂联素抗体的胶乳微球加入防腐剂B和稳定剂B，充分溶解混合40-60min进行封闭，即得封闭胶乳微球；

④向封闭胶乳微球中加入剩余的缓冲液B，混合均匀，即得R2试剂；

3)将试剂R1以及试剂R2单独分装，密封保存，即得脂联素试剂盒。

10.根据权利要求9所述的脂联素试剂盒，其特征在于：所述的偶联剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺，偶联剂的加入量为0.1-0.2g/L。