[发明专利]一种脂联素试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种脂联素试剂盒及其制备方法，该脂联素试剂盒包括R1试剂、R2试剂，其中R1试剂包括：缓冲液A 25～100mM、稳定剂A 3～11g/L、防腐剂A 2～4g/L、反应增强剂2～7g/L、表面活性剂2～5g/L；R2试剂包括：缓冲液B 25～100mM、稳定剂B 3～11g/L、防腐剂B 2～4g/L、偶联有脂联素抗体的胶乳微球1～2mg/L。本发明的脂联素试剂盒灵敏度高、稳定性好、准确性高、线性范围宽，冷藏保存有效期18个月以上，操作简便，可用于临床检测，对肥胖、糖尿病、冠心病、心血管疾病等疾病进行防治。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，尤其是一种脂联素试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

脂联素(Adiponectin/ADPN)是脂肪细胞分泌的一种内源性生物活性多肽或蛋白质。对人体的研究发现，脂联素水平能预示II型糖尿病和冠心病的发展，并在临床试验表现出抗糖尿病、抗动脉粥样和炎症的潜力。

人类脂联素含244个氨基酸，包括3个区域：氨基末端信号序列、胶原结构域和羧基末端的球形结构域。脂联素以三聚体、六聚体和高分子量聚合体三种亚型存在于血液中。临床研究显示，脂联素与II型糖尿病、冠心病、胰岛素抵抗密切相关，具有抗动脉粥样硬化形成、抗炎症和血管损伤后抗内膜增生的特性。根据国际糖尿病联会的资料，目前全球有超过3亿8千万的糖尿病患者，并且有46％的患者直到发生严重的糖尿病并发症之后才被发现。脂联素试剂盒可以检测人血中的脂联素水平，可以为糖尿病等疾病提供有价值的信息，实现对糖尿病早发现、早治疗，从而降低糖尿病的发病率。

目前，脂联素的检测方法主要有化学发光法、酶联免疫分析法、放射免疫法和胶乳免疫比浊法。化学发光法虽然灵敏简便，但是选择性差，会对一个系列的化合物做出反应，而不是针对单个的某一化合物，特异性较差。酶联免疫分析法灵敏度较高，但是操作繁琐，且难易实现自动化检测。放射免疫法优点是灵敏度较高，但是有着操作繁琐、耗时长、易受人为操作和外界因素干扰、自动化程度低等缺点，且放射性标记物会对操作者产生危害，对环境造成污染。胶乳增强免疫比浊法由于快速简便，精密度高、易于自动化、适于大批量标本同时检测等优点，被人广泛应用。然而，现有的胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒仍存在一些缺陷有待改进，如有的试剂盒灵敏度不够，有的则是稳定性不够，或者是生产效率低，成本大。

为了促进脂联素检测方法的推广应用，有必要研究一种准确度高、灵敏度高、稳定性好的脂联素试剂盒。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种脂联素试剂盒及其制备方法，该脂联素试剂盒具有准确度高、灵敏度高、稳定性好、生产效率高等优点。

为实现上述目的，本发明提供的方案如下：

一种脂联素试剂盒，包括R1试剂、R2试剂，溶剂为纯化水；其中，

所述的R1试剂包括：缓冲液A25～100mM、稳定剂A3～11g/L、防腐剂A2～4g/L、反应增强剂2～7g/L、表面活性剂2～5g/L；

所述的R2试剂包括：缓冲液B 25～100mM、稳定剂B 3～11g/L、防腐剂B 2～4g/L、偶联有脂联素抗体的胶乳微球1～2mg/L。

具体地，所述的缓冲液A和缓冲液B为甘氨酸缓冲液、MES缓冲液、MOPS缓冲液中的两种或三种结合。

优选地，所述的缓冲液A和缓冲液B为甘氨酸缓冲液10～50mM，MES缓冲液5～25mM，MOPS缓冲液10～25mM。

优选地，所述的稳定剂A和稳定剂B成分为：牛血清白蛋白1～3g/L、酪蛋白1～3g/L、甘露醇1～5g/L。

优选地，所述的防腐剂A和防腐剂B成分为：叠氮钠1～2g/L、Proclin300 1～2g/L。