[发明专利]藻菌协同增效的刺参用复合免疫增强剂、制备和应用方法

说明书

一种藻菌协同增效的刺参用复合免疫增强剂，包括半裸舟形藻以及沼泽红假单胞菌，单位重量刺参饲料中的添加浓度为半裸舟形藻10⁷～10⁹cell/g和沼泽红假单胞菌10⁶～10⁸cfu/g。本发明对影响半裸舟形藻生长的环境条件和营养因子进行优化，建立了稳定高效的半裸舟形藻培养体系。分别将半裸舟形藻与沼泽红假单胞菌活化、扩培、重悬，调整藻细胞和菌液浓度。将处理后的半裸舟形藻与沼泽红假单胞菌按比例添加到刺参饲料中对刺参进行投喂。本复合免疫增强剂各组分互利共栖、协同增效，可以通过提高生长指数、增强免疫酶和消化酶活性、提高抗病能力来综合提升刺参的非特异性免疫机能。本发明还公开了一种藻菌协同增效的刺参用复合免疫增强剂的制备方法和应用方法。

技术领域

本发明涉及微生物工程技术与棘皮动物免疫学技术领域，特别是涉及一种藻菌协同增效的刺参用复合免疫增强剂、制备和应用方法。

背景技术

刺参(Apostichopus japonicus)属于棘皮动物门、海参纲，是重要的近海水产养殖品种。刺参富含蛋白质、矿物质、维生素等多种天然活性物质，具有极高的营养和药用价值。刺参属于无脊椎棘皮动物，缺乏特异性免疫系统，主要依赖天然免疫机制对进入机体的异物进行识别、排除。刺参饲料的质量直接影响养殖刺参的健康和养殖环境质量，合理配伍的饲料添加剂可通过改善肠道健康、提高生长指数、增强抗病能力来大幅度提高刺参的非特异性免疫机能，从而提高刺参的养殖效益。

底栖硅藻被称为海洋中的天然牧草，是诱导刺参幼体附着和变态的优良诱导物，也是附着后刺参幼体生长所必需的天然适口饵料。复合型底栖硅藻杂质较多，密度有限且其中的竞争藻类甚至是有毒微藻经过培养后可能会成为优势种群，与底栖硅藻争夺生长资源。因此，开发新型、优良的单株海洋饵料底栖硅藻对刺参等水产动物的苗种生产和健康养殖具有重要的现实意义。底栖硅藻种类中的半裸舟形藻个体小、生长速度快、附着强度高，富含胞外多糖、氨基酸以及不饱和脂肪酸等营养物质，具有成为优质饵料添加剂的潜力。

沼泽红假单胞菌富含多种蛋白质、维生素、微量元素及活性物质，能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等有毒物质，同时释放具有抗病力的酵素，抑制致病菌增殖。同时，沼泽红假单胞菌适应性很强，能忍受和分解水产养殖环境中高浓度的有机物质，产生有利于水产动物生长的活性因子，增强机体的免疫能力。沼泽红假单胞菌是我国农业部公布的《饲料添加剂目录》列为养殖动物允许使用的微生物，在刺参健康养殖及疾病防控中具有良好的作用效果和广阔的应用前景。

然而，迄今为止先前技术并没有关于将半裸舟形藻与沼泽红假单胞菌合理配伍以提高养殖刺参免疫机能的相关报道或公开。市售的刺参用免疫增强剂制备及应用方式相对比较单一，其组分选择大多只是简单机械地组合，而不是经过科学选择、合理配伍的联合应用，生物利用度较低。

发明内容

有鉴于此，本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种半裸舟形藻与沼泽红假单胞菌联合应用的刺参用复合免疫增强剂。复合免疫增强剂可以通过促进生长、增强消化酶及免疫酶活性、提高抗病能力来综合提升和改善刺参的非特异性免疫机能。

本发明提供一种藻菌协同增效的刺参用复合免疫增强剂，所述复合免疫增强剂的组分至少包括半裸舟形藻以及沼泽红假单胞菌，其中，在各实验组的单位重量刺参饲料中的添加浓度为半裸舟形藻10⁷～10⁹cell/g和沼泽红假单胞菌10⁶～10⁸cfu/g。

在一实施例中，所述复合免疫增强剂在所述各实验组的单位重量刺参饲料中的添加浓度为：所述半裸舟形藻10⁸cell/g，所述沼泽红假单胞菌10⁷cfu/g。